转铁蛋白(rhTF)用于细胞培养基具有以下主要应用

重组人转铁蛋白(rhTF)用于细胞培养基具有以下主要应用:

 

1. 作为细胞增殖的必需营养素。rhTF是铁离子的载体蛋白,可以为细胞提供必需的铁离子以支持其增殖。添加适量的rhTF于细胞培养基中可以促进细胞增殖,这对维持细胞系或大规模扩增细胞至关重要。

2. 使细胞摆脱对FBS的依赖。rhTF可以提供铁离子等营养素支持细胞生长,这使得细胞可以在没有FBS或FBS浓度很低的情况下正常增殖。这减少了FBS带来的批次效应和成本负担,有利于细胞培养和生产。

3. 提供更加物理化学定量的营养条件。相比于天然的FBS,rhTF的成分更加纯净统一,添加量可以精确控制和定量。这使得细胞培养基的营养条件更加可控和物理化学定量,利于研究细胞生长与功能的规律。

4. 降低细胞培养基的成本。rhTF作为蛋白质添加剂相比FBS成本更低,尤其是用于大规模细胞培养时,rhTF可以很大程度地降低培养基成本,这对产业化生产至关重要。

5. 减少培养物污染的风险。rhTF是经过纯化处理的重组蛋白,污染物质更少,安全性更高。相比FBS,rhTF有利于减少培养基细菌、病毒及内毒素污染的风险,这对细胞培养至关重要。

对rhTF用于细胞培养基的应用,还需要从以下几个方面进行评价和优化:

1. 不同细胞类型对rhTF的依赖性。各种细胞对rhTF及铁离子需求的差异很大,所以在应用于不同细胞培养时,rhTF的添加浓度需要针对具体细胞类型进行优化和筛选。这需要评估不同浓度rhTF对细胞增殖和存活的影响。

2. rhTF与其他营养成分的配伍性。rhTF的作用与其他微量元素如维生素和氨基酸等的吸收与利用密切相关。所以在使用rhTF构建细胞培养基配方时,需要考虑各营养素之间的配伍性和相互作用,选择最佳的组合及浓度。

3. 代谢产物对细胞影响的评估。rhTF在体内的代谢过程中会产生一定的活性氧及铁离子代谢产物,这些产物对细胞也具有一定的影响。所以使用rhTF构建细胞培养基时,也需要评估这些代谢产物对细胞的影响,采取相应措施进行调控。

4. 不同rhTF产品质量的评估。不同来源和品牌的rhTF产品,其成分纯度、活性以及污染物质可差异较大,这会直接影响其用于细胞培养的效果。所以选择rhTF产品时,需要评估不同产品的质量参数,选择高质量的产品用于细胞培养。

5. 经济性评估。虽然rhTF相比FBS来说成本更低,但不同规模的细胞培养使用rhTF的具体成本也需要评估。在满足细胞培养要求的前提下,选择成本更优的rhTF添加方案和浓度,这也是其产业化应用需要考虑的因素。

rhTF用于细胞培养基的应用,还需要在实验中加以验证和优化:

1. 针对不同细胞类型,筛选rhTF的最佳工作浓度。这需要设置不同浓度的rhTF,评估其对细胞增殖、存活及功能的影响,确定最适宜的工作浓度。这是 rhTF应用于新细胞类型的关键第一步。

2. 评估不同营养添加剂与rhTF的配伍性。可以设计不同的培养基配方,选择不同的矿物质、维生素、氨基酸等与rhTF的比例与浓度进行组合,筛选出最佳的营养添加方案。这需要监测细胞在不同配方下的生长状态。

3. 检测rhTF代谢产物对细胞的影响。可以监测培养上清中活性氧及铁电镜的浓度变化,检测细胞的氧化压力变化。必要时可以添加一定的抗氧化剂等进行调控。这 can确保在应用rhTF的同时不会对细胞产生不利影响。

4. 比较不同rhTF产品的效果。选用几种不同品牌及质量的rhTF产品构建细胞培养基,监测其对细胞生长及功能的影响。选择对细胞最为适宜且经济的rhTF产品用于随后的应用。

5. 成本效益分析。对不同规模细胞培养使用rhTF的具体成本进行评估和对比,确定在满足培养要求的前提下,最为经济效益的rhTF添加方案和浓度。这为其产业化应用提供理论指导。

rhTF用于细胞培养基应用的进一步考量:

1. 不同细胞培养模式下的rhTF应用。例如对于悬浮细胞培养和贴壁细胞培养,rhTF的细胞吸收和作用机制可不同,这需要在具体细胞培养模式下进行评估和优化。

2. 规模化生产中的 rhTF应用。在细胞大规模培养及生产中,营养素的供应和代谢机制会显著不同。这需要根据不同培养容器、细胞密度等条件对rhTF的添加方案和浓度进行调整,确保其在大规模培养中的稳定供应和作用。

3. 联用其他重组蛋白的效果。rhTF与其他重组蛋白如重组胰岛素( rhINS)等的联合应用,可以产生协同促细胞生长的作用。这需要在具体细胞类型中研究不同重组蛋白组合与浓度对细胞的影响,筛选出最佳的联用方案。

4. 长期连续培养中的作用。在细胞长期连续培养或细胞株维持中,rhTF对细胞生长的影响机制可能会有所变化。这需要定期检测细胞对rhTF的依赖性变化及响应性变化,并相应调整其添加浓度,以确保其长期稳定的促细胞生长作用。

5. 维生素与 rhTF的交互作用。维生素对rhTF的稳定性与细胞吸收具有重要影响。不同类型与剂量的维生素会显著影响rhTF在细胞培养基中的效果。这需要深入研究rhTF与各类维生素之间的交互作用机制,优化其在细胞培养基中发挥最佳作用的维生素条件与浓度。

产品名称：重组人转铁蛋白(rhTF)

规格：1g/10g/100g（可给工业客户提供g级和kg级。）
纯 度：经高效液相色谱（SEC-HPLC）和SDS-PAGE检测，纯度大于95.0%.
内 毒 素：小于5EU/mg.

生化/生理作用：

研究表明，重组人转铁蛋白可促进照射和移植不相容骨髓后小鼠的异基因嵌合体。转铁蛋白促进铁向红细胞和外周组织的转移。刺激人淋巴细胞增殖。该基因的突变与转铁蛋白血症有关。

使用说明：

转铁蛋白冻干粉需要保存在冷藏状态下，使用之前再溶解。
一般用 PBS或者其它合适的溶剂在室温下将转铁蛋白冻干粉溶解成储液，浓度在 0.5-2.0mg/ml,然后用无菌滤膜进行过滤，滤液可在无菌条件下 2-8℃保存30天。