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238 人阅读发布时间:2025-10-16 11:57
一、实验痛点:传统TRIzol法的局限
在神经科学研究中,Neuro-2a细胞作为经典的神经分化模型,其RNA提取常面临:
❌ 得率不稳定:低细胞量样本(如6.98E5)RNA易丢失
❌ 纯度不足:A260/A280<1.8,A260/A230<1.0(提示蛋白/盐残留)
❌ 操作风险:苯fen接触危害,手动步骤繁琐
二、数据说话:磁珠法完胜TRIzol
1. 提取效率碾压式领xian
| 样本 | 细胞量 | 磁珠法浓度(ng/μL) | TRIzol法浓度(ng/μL) | 提升倍数 |
| 1-1/1-2 | 4.11E6 | 2742.5 | 331.68 | 8.3倍 |
| 2-1/2-2 | 5.93E6 | 2835.4 | 374.68 | 7.6倍 |
| 3-1/3-2 | 6.98E5 | 470.08 | 107.72 | 4.4倍 |
2. 纯度达顶ji标准
A260/A280:磁珠法稳定>2.0(TRIzol仅1.6-1.7)
A260/A230:磁珠法>2.0 vs TRIzol<0.7(提示有机物污染)
三、磁珠法三大核心优势
1.超高灵敏度
即使低至 7×10⁵ cells 的Neuro-2a样本,仍可提取470 ng/μL RNA,满足单细胞测序需求
2.15分钟极速流程
无需酚lv仿分层,减少操作步骤(对比TRIzol节省60%时间)
3.qPCR完美适配
高纯度RNA使Ct值标准差<0.5(客户后续qPCR数据验证)
四、客户实验场景还原
样本类型:Neuro-2a贴壁细胞(对照组+2加药组)
挑战:药物处理导致RNA降解风险升高
解决方案:
裂解后直接结合磁珠,避免TRIzol的剧烈变性步骤
专利洗涤缓冲液彻底去除抑制剂(如肝素残留)
50μL小体积洗脱,兼容微量qPCR体系