德氏乳杆菌保加利亚亚种培养指南及注意事项

　　德氏乳杆菌保加利亚亚种（Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus）是酸奶发酵的关键菌种之一。北京百欧博伟生物为您提供该菌种的培养方法及注意事项。

　　一、培养基

　　MRS培养基（推荐）：

　　蛋白胨10.0 g

　　牛肉膏8.0 g

　　酵母提取物4.0 g

　　葡萄糖20.0 g

　　磷酸氢二钾2.0 g

　　柠檬酸三铵2.0 g

　　乙酸钠5.0 g

　　硫酸镁0.2 g

　　硫酸锰0.05 g

　　吐温80 1.0 mL

　　蒸馏水1000 mL

　　pH 6.2-6.6

　　脱脂乳培养基：

　　脱脂乳粉100 g

　　蒸馏水1000 mL

　　pH 6.5-6.8

　　二、培养条件

　　温度：37°C

　　时间：18-24小时

　　厌氧条件：建议使用厌氧培养箱或厌氧罐

　　三、操作步骤

　　培养基配制：按比例称取培养基成分，溶解于蒸馏水中，调节pH值，分装后121°C高压灭菌15分钟。

　　接种：无菌操作下，将菌种接种至培养基中。

　　培养：将接种后的培养基置于37°C培养箱中，厌氧培养18-24小时。

　　观察：培养结束后，观察菌液浑浊度，判断生长情况。

　　四、注意事项

　　无菌操作：全程需无菌操作，避免杂菌污染。

　　pH值：培养基pH值需严格控制，过高或过低均会影响菌种生长。

　　温度：培养温度需保持在37°C，温度波动会影响菌种活性。

　　厌氧环境：德氏乳杆菌保加利亚亚种为厌氧菌，需在厌氧条件下培养。

　　菌种保存：菌种可短期保存于4°C冰箱，长期保存建议使用甘油管保存于-80°C冰箱。

　　五、北京百欧博伟生物服务

　　提供优质德氏乳杆菌保加利亚亚种菌种

　　提供MRS培养基等配套产品

　　提供菌种培养技术支持