biotin标记
428 人阅读发布时间:2022-07-15 09:31
一般每个抗体可以标记3~5个生物素,标记时,生物素与抗体的比率受抗体浓度影响,对于10 mg/ml 的抗体溶液来说,生物素应超过蛋白12倍(摩尔数),对于2 mg/ml 的抗体溶液应超过20倍,生物素也可以直接以粉末的形式加入蛋白溶液中。
蛋白样品不得含有叠氮钠、BSA、甘氨酸、Tris或其他任何有自由氨基的添加物。
进行抗体标记的时候,需要对抗体性质、交联剂和标记物的性质非常了解,否则很难标记出高品质的抗体;
标记量低,导致信号值低;
标记量太高,不但容易造成背景,并且还容易由于标记物的聚集造成信号拮抗,反而降低或者淬灭信号值。