羟自由基清除能力测定试剂盒说明书
322 人阅读发布时间:2021-11-25 09:15
注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义: 羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子,造成细胞结构和功能受损,进而导致体内代谢紊乱 引起疾病。羟自由基清除能力是样品抗氧化能力的重要指标之一,在抗氧化类保健品和药品研究中得到广泛应用。
测定原理:
H2O2/ Fe2+ 通过 Fenton 反应产生羟自由基,水杨酸能有效捕捉产生的羟自由基并与其反应生成有色物质 2,
3-二羟基苯甲酸,在 510nm 处有最大吸收峰,加入具有清除能力的物质后,有色物质便会减少,从而可以
根据吸光值的数值判断样品清除羟自由基的能力。
自备实验用品:
恒温水浴锅、可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 10mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体 10mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体 18 mL×1 瓶,4℃避光保存。
样品的制备:
1. 组织:按照组织质量(g):蒸馏水体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 蒸馏
水)进行冰浴匀浆,然后 10000g,4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2. 血清、果汁等液体样品可直接测定。
3. 提取物(或者药物)可配制成一定浓度,如 5 mg/mL。
资料格式:
羟自由基清除能力测定试剂盒说明书-分光光度法.doc
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