N家目录 | 加速药物筛选：Novo-Light荧光素酶报告基因检测系统

1.报告基因法

报告基因检测法是基因表达调节研究的重要手段，目前已被广泛应用于分子生物学及细胞生物学研究领域。报告基因检测法是一种将转录调控和报告基因偶联表达，通过表达产物活性的测定来判断细胞刺激物生物学活性的方法。

早在2015版《中国药典》中，报告基因法已被收录为I型干扰素活性测定的标准方法之一（通则 3523）。目前在生物制品 PD1/PD-L1、IL6/IL6R 等相关单抗药物的生物学活性检测和 Fc效应功能研究中，报告基因法均起到了至关重要的作用。

2.荧光素酶

荧光素酶（luciferase）因其灵敏度高，反应时间快成为应用广泛的报告基因，常见的荧光素酶有如下3种：

（1）萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase）

Firefly luciferase是最早被广泛研究和应用的荧光素酶之一，源自萤火虫（Photinus pyralis），分子量约为61 kDa。发光过程需要ATP、镁离子和氧气，在560nm左右波长下发光，信号强度较高，但半衰期较短。

（2）海肾荧光素酶（Renilla Luciferase）

源自海肾（Renilla reniformis），分子量约为36 kDa。发光过程无需ATP和镁离子参与。在腔肠素氧化的过程中，在480nm左右波长下的发光。常与Firefly luciferase结合使用于双荧光素酶报告系统中，作为内参对照基因。

（3）NanoLuc荧光素酶（NanoLuc Luciferase）

最新一代荧光素酶，源自深海虾（Oplophorus gracilirostris），经基因工程改造，体积更小，分子量约为19 kDa。具备更高的发光强度，信号稳定，半衰期约为2小时，适合长时间检测。

3.Novo-Light荧光素酶报告基因检测试剂盒

（1）产品介绍

Novo-Light萤光素酶报告基因检测试剂盒使用一种自主开发的新型底物，用来检测NLuc报告基因，可在荧光素酶存在下产生高强度、辉光型发光。该生物发光反应不依赖ATP，自发光背景低，光信号强，同时抑制背景发光以获得更高检测灵敏度。Novo-Light发光强度约是萤火虫以及海肾萤光素酶的150倍，可以极大的提高生物药研发过程中药物筛选和评估效率。

（2）产品特点

✔ 快速：仅需5-30min完成荧光素酶检测；

✔ 方便：将试剂盒溶液简单混合即可使用，样品检测步骤简单；

✔ 稳定：本试剂盒已通过重复性、稳定性、耐用性等严格质量标准；

✔ 准确：本试剂盒检测线性≥0.98，且发光强度优于进口品牌。

（3）在药物研发中的应用

①高通量筛选（HTS）

Novo-Light萤光素酶报告基因检测试剂盒广泛用于HTS中，以识别和验证潜在的药物候选化合物。其高灵敏度和快速响应特性使其能够检测微小的生物活性变化。

靶向特定基因或信号通路：通过在药物处理前后监测特定基因或信号通路的活性变化，筛选出对目标有作用的化合物。

大规模并行检测：一次可以测试成千上万的化合物，大大加快药物发现的进程。

②药效评估

Novo-Light萤光素酶报告基因检测试剂盒可以用于评估药物的有效性，通过监测细胞内特定基因的表达或信号通路的活性变化，评估药物的疗效。ADCC（抗体依赖的细胞介导的细胞毒性）是评估药物作用的重要方面，特别是在开发针对肿瘤和病毒感染的治疗方法时。

剂量反应曲线：通过不同浓度的药物处理，绘制剂量反应曲线，确定药物的有效剂量（EC50）。

时间依赖性分析：监测药物作用随时间的变化，了解药物的持久性和作用时间。

③药物靶点验证

在药物研发初期，通过Novo-Light萤光素酶报告基因检测可以验证药物靶点的有效性和特异性。

点基因敲降或过表达：结合基因编辑技术，验证靶点基因的作用是否与药物的效果相关。

共表达系统：在同一细胞系中共表达靶点和报告基因，通过药物处理前后荧光信号变化验证靶点。

④毒性评估

药物毒性评估是药物研发中非常重要的一环。Novo-Light萤光素酶报告基因检测试剂盒可以用于检测药物对细胞活力和健康的影响。

细胞存活率：通过监测报告基因的表达水平，评估药物对细胞存活率的影响。

细胞凋亡检测：Novo-Light可以与细胞凋亡标志物联用，检测药物诱导的细胞凋亡。

⑤药物代谢盒药代动力学研究

Novo-Light萤光素酶报告基因可以用于研究药物在体内的代谢过程和药代动力学特性。

代谢产物监测：通过监测药物代谢过程中报告基因的表达变化，研究药物代谢途径。

⑥基因治疗研究

Novo-Light萤光素酶报告基因在基因治疗研究中用于评估基因治疗载体的效率和安全性。

载体效率评估：通过检测报告基因的表达，评估基因治疗载体将目标基因导入细胞的效率。

免疫反应监测：研究基因治疗过程中可能引起的免疫反应，评估治疗的安全性。

（4）检测流程（以96孔板为例）

（5）产品数据展示

①Novo-Light与市售竞品Company P在HEK293细胞上的数据对比，显示发光强度更高。

②以A375 Luc细胞为例，Novo-Light在5E2/mL-3E4/mL的细胞密度即可进行荧光素酶报告基因的检测，且发光值与细胞密度呈线性正相关。

（6）相关产品信息