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技术资料/正文
埃博拉病毒VP40影响细胞循环和细胞外囊泡的生物发生过程
213 人阅读发布时间：2020-04-15 17:56
背景：埃博拉病毒（EBOV）主要攻击骨髓细胞。但是在其致命感染下，有大量的T细胞死亡。我们之前已经证明是外泌体中的EBOV VP40导致了受体免疫细胞的死亡。
方法：通过VP40产生的克隆，我们分析了供体细胞循环、细胞外囊泡的生物发生过程和受体免疫细胞的死亡。通过激酶和染色质免疫沉淀实验，我们检查了细胞周期蛋白D1的转录和VP40的核定位。通过质谱、细胞因子和蛋白质免疫印迹实验，我们分析了细胞外囊泡的内含物。野生型埃博拉病毒感染实验在生物安全P4实验室平台进行。
结果：VP40细胞外囊泡诱导了受体T细胞和单核细胞的凋亡。细胞周期蛋白D1上调，导致VP40克隆加速产生，核心的VP40结合到细胞周期蛋白D1的启动子上。细胞循环被加快，与细胞外囊泡的生物发生过程有关，最终产生了数量更少、但粒径更大的细胞外囊泡。VP40的细胞外囊泡内含物富含结合核糖核酸的蛋白和细胞因子（白细胞介素-15、转化生长因子-β1和干扰素-γ）。最终，感染埃博拉病毒的细胞和细胞外囊泡中包含VP40、核蛋白质和糖蛋白。
结论：VP40上调了细胞周期蛋白D1的表达水平，导致异常的细胞周期和细胞外囊泡的生物发生过程。被埃博拉病毒感染的细胞所产生的细胞外囊泡中包含的细胞因子和埃博拉病毒蛋白引起了免疫细胞的大量死亡。
方法：通过VP40产生的克隆，我们分析了供体细胞循环、细胞外囊泡的生物发生过程和受体免疫细胞的死亡。通过激酶和染色质免疫沉淀实验，我们检查了细胞周期蛋白D1的转录和VP40的核定位。通过质谱、细胞因子和蛋白质免疫印迹实验，我们分析了细胞外囊泡的内含物。野生型埃博拉病毒感染实验在生物安全P4实验室平台进行。
结果：VP40细胞外囊泡诱导了受体T细胞和单核细胞的凋亡。细胞周期蛋白D1上调，导致VP40克隆加速产生，核心的VP40结合到细胞周期蛋白D1的启动子上。细胞循环被加快，与细胞外囊泡的生物发生过程有关，最终产生了数量更少、但粒径更大的细胞外囊泡。VP40的细胞外囊泡内含物富含结合核糖核酸的蛋白和细胞因子（白细胞介素-15、转化生长因子-β1和干扰素-γ）。最终，感染埃博拉病毒的细胞和细胞外囊泡中包含VP40、核蛋白质和糖蛋白。
结论：VP40上调了细胞周期蛋白D1的表达水平，导致异常的细胞周期和细胞外囊泡的生物发生过程。被埃博拉病毒感染的细胞所产生的细胞外囊泡中包含的细胞因子和埃博拉病毒蛋白引起了免疫细胞的大量死亡。