重组抗体表达纯化

钟鼎生物拥有完善成熟的哺乳动物蛋白表达平台，结合抗体纯化、亚型鉴定、抗体测序、重组抗体亲和力成熟等先进平台能为客户提供优质的重组抗体表达服务，包含鼠源单克隆抗体构建及表达、更换恒定区亚型的嵌合抗体表达，抗体人源化改造及表达等服务。

1. 钟鼎拥有专门的哺乳动物细胞蛋白表达实验平台和抗体制备技术平台，可以实现实验无缝对接，让项目一体化，流程均一化成为可能，在时效上和质量上有保证。

2. 丰富的抗体表达载体资源让我们的抗体表达服务如虎添翼，只需要提供重链及轻链可变区序列，亚克隆至特定的表达载体中，即可开始表达项目。最重要的是，我们免费提供哦！

3. 成熟的序列优化技术，配合 HEK293T 改良细胞系，最大程度激发表达潜能，常规瞬时转染小试产量在 10～200mg/L。

4. 经过优化的稳定表达株，产量高达 4.5g/L，可提供，亦提供 50 L 以内的发酵生产服务。     

在获得了抗体轻（重）链可变区的前体下，为了获得高产量的，高特异性的重组抗体蛋白，我们会在多个方面进行资源调配和合理优化。

● 根据抗体亚型和应用要求，选择恰当的恒定区骨架质粒。目前，我们可以提供小鼠、人、兔等物种的的恒定区骨架质粒，通过重组无缝克隆方式将可变区基因连入表达载体,无需客户重新基因合成或调取。可变区测序时，尽可能挑取多个阳性克隆，确认序列无误。

● 我们筛选出来有多条高效率的抗体分泌信号肽，一般情况下我们使用来自于利钠肽V5高效信号肽进行分泌表达，当抗体部分泌或产量偏低时，我们可能会设计并构建多种信号肽的表达质粒平行试验，筛选最佳的信号肽方案。

● 配合我们的抗体表达质粒，我们会有针对性的选择 293 和 CHO 相关细胞系，并摸索最佳的细胞转染条件，实现转染试剂品牌与用量、细胞培养成本、表达量的最佳配比，以期达到最经济科学的实验条件。

● 常规实验设计中，我们根据 FC 的信息会选择 Protein A/G 对重组抗体进行纯化，不会添加额外的融合标签,对于高纯度要求的抗体，使用 AKATA 进一步纯化，根据纯度和量的要求额外加收费用。

● 常规的科研级别抗体表达订单中，客户可免费使用我们的表达体系，但我们最终只交付抗体终产物，不赠送表达体系及关键的技术信息。（合作开发项目另议）

补充说明

1. 正常情况下，抗体蛋白的表达量都比较可观，但是某些突变序列产量会偏低，因此我们蛋白交付量跨度较大。

2. 一般我们使用还原性和非还原性电泳检测重组抗体，如果客户需要验证抗体的特异性，需提供额外抗原使用 WB 检测。

3. 我们使用哺乳动物细胞表达获得重组抗体，我们只承诺蛋白序列与设计相符，不承诺重组抗体具有客户预期的生理活性。

4. 即使蛋白不表达或表达量极低，我们无法获得目的蛋白，我们也会提供全套的实验流程和原始照片。

编辑： dxy_8hxjask7    来源：丁香园