羊驼「纳米抗体」制备
钟鼎生物的技术总监是国内首批研究单域抗体的科学家之一，拥有十余年纳米抗体制备经验。随着抗体药物研究方兴未艾，研究机构和医药企业需求日益增多。应客户之急迫需求，我们在南京建立了羊驼饲养繁育基地，拥有健康适龄、免疫背景清晰、父系种源可查的羊驼 20 余只，配备专业的兽医和饲养设施。
南京羊驼饲养基地，客户可亲临养殖基地取样，监督免疫，实时查看实验动物状态；
针对不同客户的预算需求，我们可以提供多种服务模式：可提供空白羊驼进行免疫，亦可使用重复免疫的动物（不同抗原免疫小于 3 种）；
灵活的交付模式： 可提供血清或动物脾脏（客户可亲临养殖基地取样，监督免疫）；
客户自行购买羊驼，委托我公司代为饲养或免疫。
钟鼎生物拥有成熟的蛋白定制平台，依据项目要求，可选原核表达体系，哺乳动物表达体系，杆状病毒-昆虫细胞体系，配合 AKATA 纯化设备可以制备纯度大于 95%，浓度大于 2 mg/ml 的蛋白免疫原，保证满足免疫需求。
免疫周期表 | ||
动物要求 雌性健康羊驼一只 15 ~ 20 月龄 体重50 kg 左右 抗原要求 浓度大于 95 % 浓度 2 mg/ml 2ml 如具致病性请提前告知 不含叠氮化钠 | 0 ~2 天 | 免疫原检测，免疫前采血，预留阴性血清 |
3 天 | 完全弗氏佐剂混合抗原乳化，皮下多点免疫 | |
25 天 | 不完全弗氏佐剂混合抗原乳化，皮下多点免疫 | |
32 天 | 采外周血，ELISA 检测抗血清效价 | |
46 天 | 不完全弗氏佐剂混合抗原乳化，皮下多点免疫 | |
52 天 | 采外周血，ELISA 检测抗血清效价 | |
65 天 | 不完全弗氏佐剂混合抗原乳化，皮下多点免疫 | |
72 天 | 采集 50 ml 外周血，用于纳米抗体库构建 | |
不是所有的抗原都能使动物产生免疫应答，根据我们的经验，如果经过 3~4 次免疫后检测血清效价（OD450≈1.0）小于 5000，我们建议客户终止项目。
抗原的要求
1. 抗原纯度
高纯度的抗原在产生免疫应答与筛选过程至关重要，因此建议客户抗原纯度在 95% 以上。我们在收到客户抗原后，会通过 SDS-PAGE 检测抗原纯度。
2. 抗原量及安全性
根据不同抗原，需要客户提供不同量的抗原，请提前与技术人员沟通。同时客户不得隐瞒抗原是否具有致病、致死危险，如有隐瞒且造成实验动物死亡客户需要额外支付动物和项目成本费。
3. 抗原浓度
抗原浓度保证在 2 mg/mL，且不含叠氮钠。建议使用干冰运输至我公司。
纳米抗体相关服务 | 周期 | 流程 |
构建噬菌体抗体库 | 3～4周 | 1. 第四次免疫结束后，从静脉抽取 50 mL 全血，用于分离外周血淋巴细胞； 2. 抗体库质量： （1）插入率﹥95%，随机挑取 48 个克隆测序，没有重复序列； （2）抗体库容量达到 107~108次方； 3. 向客户提供质检报告与抗体库。 |
抗体库筛选 | 3 周 | 1. 根据项目实际情况，选择不同的筛选方案： 如竞争筛选，固相筛选，液相筛选，负筛选等筛选方法； 2. 免疫抗体库，每轮筛选后挑取 24 个克隆进行鉴定； 3. 向客户提供 5 个以上的特异性克隆。 |
纳米抗体表达纯化 | 2 周 | 1. 将纳米抗体基因克隆至真核或原核表达载体； 2. 向客户提供高纯度纳米抗体。 |
亲和力测定 | 1 周 | 采用 biocore 测定抗体的亲和力。 |
