使用UPLC/MS/MS分析血清中的25-羟基维生素D

维生素D缺乏症在世界许多地区的成人和儿童中非常普遍。除了众所周知的影响(例如与钙吸收障碍相关的佝偻病、骨质疏松症和骨软化症)外，现在越来越多的证据表明维生素D缺乏症还会增加罹患某些癌症的风险，并对许多其它疾病有一定的影响，例如：糖尿病，心血管疾病，多发性硬化，精神类疾病等。维生素D具有两种存在形式，一种是皮肤暴露于日光下所产生的维生素D3，另一种则是存在于多种补品中的植物衍生物-维生素D2。维生素D在肝脏中代谢形成25-羟基维生素D (25OHD)，后者在肾脏中进一步代谢形成活性代谢物1,25-二羟基维生素D。25OHD的水平被认为是评价体内维生素D水平的最佳临床指标。维生素D水平的评估对于维生素D缺乏症的诊断和补充治疗的监测非常重要。传统免疫检测的主要问题是无法区分25OHD2和25OHD3，还需依靠抗体与25OHD2的交叉反应才能测定25OHD的总浓度。如果该交叉反应低于100%，那么D2治疗可能无法得到准确监测。因此，利用LC-MS/MS方法定量分析25OHD2和25OHD3在提高检测质量和降低成本方面，更加受到人们的青睐，已经成为25OHD检测的金标准。

 

解决方案

LC系统： Waters ACQUITY UPLC系统

质谱仪： ACQUITY TQD

色谱柱： ACQUITY UPLC BEH C8, 2.1 x 50 mm, 1.7 μm

使用QuanLynx定量软件和ApexTrack™积分算法进行数据处理。以2.5-100 ng/mL作为浓度范围对分析方法的线性进行考察，线性良好。下面是最低浓度校准品的色谱图。各色谱图标记了化合物名称、峰间信噪比(SNR)和浓度。所有响应均高于检测限(SNR 5:1)，因此，本方法可检出维生素D严重缺乏症患者的维生素D水平(<6 ng/mL)。

沃特世开发的利用UPLC/MS/MS分析血清中25OHD2和25OHD3的方法。具有良好的线性、灵敏度和精度。本方法与传统的免疫测定法相比，可提供更加可靠的结果。UPLC/MS/MS能够准确可靠地测定血清中的25OHD2和25OHD3，防止误报接受D2补充治疗的患者体内的维生素D总体浓度。

 

如需了解更多临床检测方法开发和方案，请联系沃特世临床专家 tao_jiang@waters.com 或 021-6156 2666。