低血清MEM培养基使用效果
采用分阶段驯化法驯化BHK21细胞适应 MD611低血清MEM培养基，经5～6代后细胞逐渐适应，可建立生产用细胞种子库。已适应MD611的BHK21细胞在血清含量大于2％的情况下均能稳定传代，连续传代均在30代以上，能够满足生产需要。
MD611低血清MEM培养基低血清方瓶培养BHK21细胞
使用MD611低血清MEM培养基，在T75细胞培养瓶中，低血清（3％血清含量）培养BHK21细胞，细胞轮廓清晰并具有较强立体感，形态良好，细胞生长旺盛，可以大分种比例进行细胞传代培养。以1:10分种比例进行细胞传代培养，接种培养4小时，细胞开始贴壁伸展；培养18小时，细胞进入快速生长期；培养24小时，生长为单层细胞；培养48小时，细胞生长为致密单层。
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| BHK21细胞培养4小时 | BHK21细胞培养18小时 |
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| BHK21细胞培养24小时 | BHK21细胞培养48小时 |
MD611低血清MEM培养基低血清培养BHK21细胞生产口蹄疫疫苗
以MD611低血清MEM培养基低血清培养BHK21细胞生产口蹄疫疫苗，BHK21细胞可连续传代30代以上，培养细胞生长数量与传统MEM（10％血清含量）培养基培养效果相当。（见表1）接种口蹄疫病毒后，MD611低血清MEM培养基低血清培养BHK21组病毒效价不低于传统MEM（10％血清含量）培养基细胞组，符合疫苗规程，BHK21细胞在适应MD611低血清MEM培养基后，对口蹄疫病毒仍然敏感。（见表2）
表1 MD611低血清MEM培养基培养BHK21细胞的生长情况（×107）
| 组别 | 细胞接种量（0h） | 细胞数量（24h） | 细胞数量（48h） | 细胞数量（72h） | 连续传代次数 |
| MEM培养基 +10％血清（对照组） | 0.462 | 0.83 | 1.86 | 2.51 | 30代 |
| MD 611 +2％血清 | 0.387 | 0.68 | 1.84 | 2.20 | 30代 |
| MD 611 +3％血清 | 0.403 | 0.752 | 2.28 | 2.04 | 30代 |
表2 MD611低血清MEM培养基培养BHK21细胞繁殖口蹄疫病毒的效价
| 组别 | 第一次试验 | 第二次试验 | 第三次试验 | 平均值 | ||||
| TCID50 | LD50 | TCID50 | LD50 | TCID50 | LD50 | TCID50 | LD50 | |
| MEM培养基 +10％血清（对照组） | 7.5 | 8.0 | 7.61 | 7.67 | 7.5 | 7.5 | 7.54 | 7.72 |
| MEM SLM+2％血清 | 7.61 | 8.5 | 8.17 | 8.0 | 7.83 | 7.67 | 7.87 | 8.0 |
| MEM SLM+3％血清 | 8.0 | 8.33 | 7.83 | 8.0 | 7.61 | 7.67 | 7.83 | 8.0 |
MD611低血清MEM培养基低血清培养鸡胚成纤维细胞生产猪伪狂犬病活疫苗
利用猪伪狂犬病毒弱毒株（Bartha-K61）进行细胞培养，观察不同细胞培养基维持鸡胚成纤维细胞单层（CEF）生长情况，并测定病毒产量（TCID50/ml）。结果在生产条件下，应用低血清培养基（MEM SLM）添加0.5～2%新生犊牛血清，制备的维持液培养细胞单层生长良好，细胞间隙不明显，细胞形态正常。细胞单层接种病毒培养18～24小时左右，有少量细胞形成CPE，继续培养至48小时左右，70%以上细胞产生CPE，此时病毒增殖达到高峰，测定病毒产量达到2×10-6.75～2×10-7.5TCID50/ ml，符合猪伪狂犬病活疫苗制苗要求，实际应用低血清培养基制备的活疫苗可有效防制疫苗注射引起的过敏反应。（见表3和表4）
表3 MD611养基培养CEF细胞生长情况和病毒特异性CPE形成情况比较
| 组别 | 维持液种类 | 血清含量（%） | 细胞单层生长状态 | 病毒特异性CPE形成（18小时） | |
| 试验组 | Ⅰ | MD611 | 2% | 细胞单层生长状态优良，无可见细胞间隙，细胞形态良好 | 少量细胞形成CPE |
| Ⅱ | MD611 | 0.5% | 细胞单层生长良好，细胞间隙不明显，细胞形态正常 | 少量细胞形成CPE | |
| 对照组 | Ⅰ | BD-199 | 2% | 细胞单层生长良好，细胞之间间隙很少，形态正常 | 少量细胞形成CPE |
| Ⅱ | BD-199 | 1% | 细胞单层生长状态变差，形态瘦长，细胞间隙增大 | 少量细胞形成CPE | |
表4 MD611低血清MEM培养基在猪伪狂犬病活疫苗生产中不同批次细胞毒液的TCID50/ ml比较
| 批次 | 维持液种类 | 维持液血清含量 | TCID50/ ml |
| 060713 | BD-199 | 2% | 2×10-7.0 |
| MD611 | 2% | 2×10-7.25 | |
| 060728 | BD-199 | 2% | 2×10-7.25 |
| MD611 | 2% | 2×10-7.5 | |
| 060811 | BD-199 | 2% | 2×10-7.25 |
| MD611 | 2% | 2×10-7.25 | |
| 060818 | BD-199 | 2% | 2×10-7.0 |
| MD611 | 2% | 2×10-7.25 | |
| 070503 | BD-199 | 1% | 2×10-6.5 |
| MD611 | 0.5% | 2×10-7.0 | |
| 070510 | BD-199 | 1% | 2×10-6.75 |
| MD611 | 0.5% | 2×10-7.25 | |
| 070523 | BD-199 | 1% | 2×10-6.25 |
| MD611 | 0.5% | 2×10-6.75 | |
| 070530 | BD-199 | 1% | 2×10-6.5 |
| MD611 | 0.5% | 2×10-7.0 |
默克密理博北京清大天一细胞培养基的研发、制造适应了疫苗、抗体药物行业的技术发展需要和生产需要，细胞培养基产品和业务包括无血清培养基、低血清培养基、反应器悬浮培养基等个性化细胞培养基，基础细胞培养基，以及客户定制细胞培养基服务。