不同病毒载体感染单位的表示方法
不同的病毒载体,其表示感染单位的方式有所不同。
早期的逆转录病毒载体一般用CFU,是“clone forming unit”的简称,叫做“克隆形成单位”。感染性滴度的单位一般表示为CFU/ml。这是因为最早的逆转录病毒系统是Dr. Dusty Miller 建立的LN 系列(包括LN,LXSN,LNSX,LXCN,LNCX 等),包装细胞株是PA317,psi2,G&P86 等。在这套载体中N 代表了neo 基因,X 代表外源基因,S 代表SV40 启动子,C 代表CMV 启动子,L 代表逆转录病毒的LTR,具有启动子功能。因此,早期的LN 系列载体是双表达载体,重组病毒中有neo 基因的表达单位,滴度测定时用病毒感染NIH3T3 细胞,用G418 选择培养,根据形成neo 基因抗性克隆的多少来计算病毒滴度,因此滴度的单位就用cfu/ml 来表示了。这种表示方法至今还很常用。
腺病毒载体的感染单位一般用PFU 表示,是“plaque formingunit”的简称,叫做“空斑形成单位”。感染性滴度的单位一般表示为PFU/ml。由于测定pfu 往往重复性较差,因此近些年许多研究又开始采用古老的TCID50 方法来计算腺病毒的感染单位。