cardioEasy心肌细胞Q&A
Q:什么是CardioEasy人心肌细胞？
A:CardioEasy人心肌细胞是一种即用型的高纯度心肌产品。该产品采用Cellapy的高效心肌定向分化和纯化方法产生。同时，包括iPS细胞在内的所有细胞培养分化过程采用化学成分确定的培养试剂。CardioEasy人心肌细胞具有与体内心肌细胞高度相似的特性，可用于各类生理、药理、转基因、疾病模拟等实验研究。
Q:CardioEasy人心肌细胞有哪些优势？
A: ● 是目前唯一可长期培养的人心肌细胞。相对于常用的动物心肌细胞，CardioEasy心肌细胞与人活体内的心肌细胞更为接
近，其细胞形态、组织结构、基因表达、新陈代谢、电生理特性、收缩搏动、及毒理药理反应都与人类心肌细胞一致；
● 高纯度，≥95%；
● 具有高度稳定性，可在体外长期培养，实验结果重复性好；
● 易于转染，可配合市场上各类转染试剂使用；
● 来源丰富，可以满足大规模实验与生产的需求；
● 为产品配套心肌细胞培养基，并提供专业的技术服务，保证实验的成功进行。
Q:CardioEasy人心肌细胞通过了哪些指标的检测？
A:通过形态学、基因表达谱、电生理、收缩功能、信号通路、和毒理药理反应的检测，证实CardioEasy人心肌细胞与人体内心肌细胞高度相似。
Q:CardioEasy人心肌细胞所含的细胞亚类有哪些？
A:通过MLC2v、MLC2a和HCN4蛋白的免疫荧光检测，表明CardioEasy人心肌细胞中含有70-80%的心室肌样细胞、20-30%的心房肌细胞和<5%的窦房结样细胞。
Q:CardioEasy人心肌细胞可用于哪些用途？
A: √ 人心脏病理生理学研究
√ 毒理实验
√ 药物安全性评估
√ 新药研发
√ 疾病模型
Q:CardioEasy人心肌细胞已用作于哪些类型的实验研究？
A:美国CDI公司生产的，与CardioEasy同类的人心肌细胞细胞，已经被广泛用于心脏机理研究和药物研发。具体实验包括：细胞毒理、细胞线粒体活性、钙荧光成像、膜片钳（电生理学）、微电极阵列（电生理）、基因表达（蛋白质和RNA）等等。大量此类研究已经发表于高水平SCI期刊。
Q:CardioEasy人心肌细胞的保存条件。
A:在收到置于干冰里的细胞后，迅速（离开低温条件不超过15s）转移至液氮保存。细胞在液氮条件下可保存6个月，但越早复苏细胞活性越好。注意：-80℃条件保存会降低细胞的活性，应在2周内复苏。
Q:CardioEasy人心肌细胞用什么培养基？
A:Cellapy公司为CardioEasy人心肌细胞配套有CardioEasy接种培养基（细胞复苏）（Cat. no. CA2002100/2002500）、CardioEasy维持培养基（细胞培养）（Cat. no. CA2003100/2003500）和CardioEasy纯化培养基（心肌细胞富集）。
Q:如何提高CardioEasy人心肌细胞的复苏存活率？
A:CardioEasy人心肌细胞复苏的要点是：1. 复苏过程的时间要短，水浴解冻的时间＜90s，转移至超净台的过程＜20s，滴加液体的时间＜5min；2. 转移和混匀细胞时要避免剧烈吹吸，因为心肌细胞极易受到物理剪切力的伤害；3. 准确控制滴加液体的速度，并在滴加过程中不断摇晃。
Q:接种后CardioEasy人心肌细胞没有跳动怎么办？
A:经过Cellapy公司的严格质检，CardioEasy人心肌细胞一般在接种后2-3天开始跳动，不超过4-5天。如果心肌细胞长时间不跳动，请检查培养箱的温度和CO2浓度，或者联系电赛贝生物技术支持。
Q:CardioEasy维持培养基的换液频率是多长？
A:细胞复苏贴壁48小时后，首次更换CardioEasy接种培养基为CardioEasy维持培养基，以后每两天换液一次，或者加入标准量150%的维持培养基，每3天换液一次。
Q:CardioEasy人心肌细胞是否可以增殖？
A:CardioEasy人心肌细胞是终末分化的细胞，与人体内的心肌细胞一样，不能增殖扩增。
Q:CardioEasy人心肌细胞可以在体外稳定维持多长时间？
A:CardioEasy人心肌细胞能在3个月内维持基因表达的稳定性，12个月内维持特征与功能的完整性。考虑到非心肌细胞的增殖，3个月以上的研究项目需要每3个月用CardioEasy纯化培养基进行一次纯化处理。
Q:CardioEasy纯化培养基的作用是什么？
A:根据心肌细胞的生理特性，采用Cellapy独有的配方，使非心肌的细胞在纯化培养基中无法存活。纯化后2周内，心肌细胞的纯度可达到99%。
Q:CardioEasy人心肌细胞如何消化成单细胞？
A:CardioEasy人心肌细胞在复苏培养达到正常状态后，还可以根据实验需要进行重新接种。37℃下0.25%胰蛋白酶（推荐Gibco的Triple Express产品）消化10-20min，可以使心肌细胞完全变圆脱落，经过吹打后可以形成单细胞悬液。
Q:CardioEasy人心肌细胞如何形成单层组织？
A:以24孔板为例，每孔接种1-2×105心肌细胞，可以形成均一的同步化跳动的单层心肌组织。
Q:CardioEasy人心肌细胞消化并重新接种后停止跳动怎么办？
A:CardioEasy人心肌细胞在重新接种后，一般于48h内重新开始跳动，但是反复接种会降低心肌生理活性，复苏后的心肌产品消化接种不应超过3次。此外，低密度接种后的细胞（密度太低，无法形成同步化跳动的单层细胞），再次消化后无法保证生理活性的回复。