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鼎昊源 TL2010S 组织研磨仪为科研生产解决了一件烦心事。北京某诊断试剂生产企业需要对采集到的大量的新鲜动物组织样品进行破碎处理,用于后续做不同方法的对比分析。然而,该动物组织韧性较大,使用实验室现有的组织匀浆器或手动研磨,不仅一次处理通量少、易污染且难清洗,处理后的样品还不够均匀细致,样品损失过多,基本达不到做后续分析实验的要求。为此,项目一度无法大规模开展。该企业实验室人员联系鼎昊源科技,申请试用鼎昊源 TL2010S 组织研磨仪(又称 TL2010S 中通量组织研磨仪)进行样品破碎处理,在鼎昊源科技工程师现场协助下,共同摸索出批量快速高效破碎动物组织样品的好方法。 以下是实验的操作要点(实验过程中也对自动研磨和手动研磨的结果进行了对比): 实验材料及试剂 1. 实验材料:将 10 例新鲜动物组织样本分别用吸水纸吸干表面的水分后,称重后分装为 2 管/例,20 mg±0.3 mg/管。 2. 实验试剂:天根 DP422 DNA/ RNA 共提试剂盒 实验过程 1. 研磨 【自动研磨】向离心管内加入 300 μl 裂解液。将离心管放于液氮中,冷冻处理。 液氮冷冻处理后的离心管固定于自动组织研磨仪适配器中,向离心管中加入 2 粒3 mm 磁珠。小心将适配器正确安装至自动组织研磨仪上,设置研磨参数: 5 轮循环数,60 s/轮,10 s 间隔。启动仪器,研磨组织。研磨后,再向离心管中加入 300 μl 裂解液(裂解液总使用量为 600 μl)。 【手工研磨】取样本放于研钵中,加入液氮后迅速研磨。将组织粉末转移至离心管中,称重后向其中加入 600 μl 裂解液。 2. 核酸提取、检测及保存 将上述分别使用两种研磨方法处理后的样本,使用 DNA RNA 共提试剂盒同时提取 DNA 和 RNA。使用微量分光光度计测定 DNA、RNA 的浓度及纯度。DNA 提取后于-20℃ 保存,RNA 于-80℃ 保存。 实验结果 实验结论 鼎昊源 TL2010S 组织研磨仪处理与手工液氮研磨处理后提取动物组织的 DNA、RNA 在浓度、纯度上均无显着性差异(成对检验 P>0.05)。但手工研磨有较大的样本损失率,对于 DNA 提取浓度较低的样品来说,自动组织研磨仪可以做到样品 0 损失,在 DNA 提取上有着明显的优势,且手工处理的过程复杂、易交叉污染,操作所用时间等方面均不及鼎昊源TL2010S 组织研磨仪,因此 TL2010S组织研磨仪对于 DNA 提取工作相对于手工研磨处理有很大优势。 好的效果离不开仪器的强大和实验人员的共同努力,各位看官可以看看以下这些问题是否也是我们样品前处理时常遇到的问题呢? Q1. 为什么实验室人员之前使用常规组织匀浆器无法实现较好的破碎处理呢? A1. 鼎昊源科技通过大量样品破碎测试发现,动物组织类样品本身相比其他样品更难破碎,特别是一些结缔组织、心脏组织、肺部组织,因为韧性较大,一般很难用普通手工研磨或者常规组织匀浆器彻底破碎,所以也就无法满足后续精细的实验要求。而使用鼎昊源TL2010S组织破碎器,可针对不同体积和数量的样品,搭配不同规格的离心管及适配器,进行多样品的同时高速破碎。不仅操作灵活方便,还同时避免了样品间的交叉污染,省去了清洗仪器的繁琐工作。 Q2. 为什么要设置间歇研磨破碎呢? A2. 间歇研磨是鼎昊源 TL2010S 组织破碎器一个特色功能之一。设置一定的间歇时间,可以有效减少样品在持续高速研磨破碎中因快速升温而发生降解的情况,为后续实验的顺利进行提供保障。如果配合液氮低温处理,可以更有效地降低样品温升,利于 RNA提取等对温度敏感的实验。 |