基因敲除细胞蛋白水平验证的挑战和解决方案

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讲师介绍

范丽莉 赛业生物细胞基因编辑生产经理
华南农业大学毕业,从事细胞基因编辑相关研究超7年,具有多年分子生物学和细胞生物学相关实验技术的研究经验。

视频介绍

在建立基因敲除(KO)细胞株后,我们必须对细胞株进行充分的验证,以确保细胞株构建成功。除了采用常规的PCR、测序等方法外,蛋白水平的Western blot(WB)验证也尤为重要。你有没有经历过,WB鉴定蛋白与PCR测序结果不一致?WB结果中无信号或显示信号弱?

在WB验证中,偶尔会出现测序鉴定为KO纯合子但WB检测却显示有蛋白残留。出现这种情况的原因众多,其中由外显子的可变剪切引起的蛋白残留是最为复杂的,其影响因素包括细胞系的类型,靶基因和细胞的培养环境等。总的来说,蛋白残留跟gRNA的设计、基因(或mRNA)的可变剪切、WB抗体的选择等因素都密切相关。

不过无需担心!针对这些疑难杂症,赛业生物细胞基因编辑生产经理范丽莉将带来「基因敲除细胞蛋白水平验证的挑战和解决方案」线上课程,从基因敲除细胞系构建、细胞株验证等多个应用场景展开,为大家详细讲解基因敲除细胞系鉴定方法与技术特点,以及优化gRNA设计、提高编辑效率的实验技巧,通过具体操作案例分析实现体外疾病模型构建的创新策略
 

📝课程亮点:

🌟基因敲除细胞系相关研究及应用场景

🌟基因敲除细胞系构建策略及课题解决方案

🌟基因敲除细胞系鉴定方法与技术特点

🌟基因敲除细胞系的使用及其常见问题解析

 

赛业生物自主开发的细胞基因编辑系统Smart-CRISPR™,是基于人工智能技术所建立的综合算法,通过最优的gRNA设计结合抗体分析,及阶段性WB测试等策略,为您提供科学的解决方案,让您不再为KO细胞蛋白残留问题而发愁。