免疫荧光是免疫学技术的一个重要组成部分,有着其特殊的优势和用途,特此整理相关内容以便学习:【求助】间接免疫荧光法二抗★以上为基础医学主要专业讨论版版块发表的帖子，共：1个★细胞免疫荧光图像分析★以上为计算机与医学、生物学软件版块发表的帖子，共：1个★免疫荧光组织化学技术★以上为临床病理讨论会版块发表的帖子，共：1个★时间分辨免疫荧光技术在国内开展得如何？★以上为临床检验医学讨论版版块发表的帖子，共：1个★（急求）tune ...

免疫荧光是标记免疫技术发展最早的一种，它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术，通过将抗体与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。免疫荧光步骤包括，细胞固定和通透，封闭，孵育一抗，二抗等。除了这些基本步骤，以下建议可以帮助您获得更好的实验结果。 1、细胞固定和通透 为达到最佳的检测效果，细胞需要经过固定和通透。这些步骤非常关键，细胞和抗原需要保证最佳的结构，并利于抗体与抗原 ...

就如上新手进阶要点总结之后，笔者总结了一下免疫荧光需要特别关注的细节，以期作出更完美的图片效果。1、了解及预测蛋白的定位例如：下图使用肺动脉内皮细胞（ BPAE）观察线粒体的显色，采用 405nm，488nm，561nm 的激光，100x NA 1.49 的物镜对细胞内线粒体的分布进行简单的观察，此图可见，单纯的 mito-tracker 并不能清晰看见线粒体内部的结构和蛋白相关关系，因此，明确蛋白定位，根据所需分辨率选择显微镜、相应的荧光蛋白和 ...

1、问：免疫荧光：用免疫荧光方法做同样的内容，组织切片和培养细胞，两者操作过程中有哪些不同？参考见解：只是固定方法不同，细胞固定用甲醇，切片固定用多聚甲醛，而染色方法是一样的。2、问：近期要做免疫荧光双标，不知哪位有免疫荧光双标技术的详细步骤以及注意事项？参考见解：我正在做冰冻组织切片的免疫荧光的双染。有些体会：（1）选取primary antibodies时要来源于两种不同的动物，我用的是来源于 ...

定量免疫荧光测定     激光扫描共聚焦显微镜可以对经过荧光标记的组织标本共聚焦荧光进行定量分析．并显示荧光沿Z轴的强度变化。它除了可以对单、双或三重标记的细胞及组织标本的荧光进行定量、定位分析外，还可以借助显微CT功能在不损失分辨率的前提下对标本深层进行荧光分布的测量．获得组织形态结构信息。激光扫描共聚焦显微镜同样适用于高灵敏度的快速免疫荧光测定，从而准确检测抗原表达、荧光原位杂交斑点及组织细胞 ...

问：神经干细胞nestin和EphrinA4的免疫荧光双标怎么做？ 答： 过程和一般的免疫染色一样就是封闭的时候用两种血清混合封闭1：1 加入一抗和二抗的时候也是混合加入 但是因为稀释浓度不好掌握最好提前作预试~ 补充一点，荧光双标记必须选择的一抗抗性不同，如一个是兔多抗，一个是鼠单抗，那么二抗分别采用抗兔，抗鼠的不同颜色标记的荧光二抗即可。 ...