T 细胞分选与扩增专题

建立高效,高活性的细胞分选与扩增方法对后续实验研究至关重要。本课程系列涉及常见的细胞分选方法,怎样移除选后细胞的表面标记;用 MHC 四聚体分离检测 CD8+ T 细胞;如何在体外联合使用 CD3、CD28 的抗体刺激T细胞等内容。

实验资料

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用 CD3/CD28 做好 T 细胞激活与扩增

机体免疫应答过程的复杂性和严格的调控性,是由多种免疫细胞和免疫分子共同参与完成的。而T淋巴细胞的活化,在免疫应答中扮演着相当重要的角色。研究表明,诱导T细胞的活化与增殖需要两种信号:一种是 TCR/CD3 与抗原提呈细胞(APCs)表面特异的 MHCⅡ 抗原肽复合物结合产生的特异性抗原刺激信号;另一种是非特异性协同刺激信号,由 APCs 表面的协同刺激分子和 T 细胞的相应受体相互作用后产生,其中 CD28/B7 是最为重要的协同刺激分子,能增加 IL-2 的 ...
来源:德国IBALifesciences
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用全血直接分选 CD3+ T 细胞

免疫亲和层析是以 Fab 片段为基础的无痕亲和细胞分选技术(traceless affinity cell selection, Fab-TACS)。Fab-TACS 运用免疫亲和层析的原理,使用细胞表面抗原分子 CD marker 中的 Fab 片段来进行捕捉及释放目的细胞。以抗体的 Fab 片段取代一般具有高亲和力的完整抗体,实现试剂与细胞的可逆结合,直接从全血或其他血液样本中分选目的细胞。Fab-TACS 柱子填充了包被有 Strep-Tactin® 多聚体的细胞级琼脂糖 ...
来源:德国IBALifesciences
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这种阴选方法快速简单,10 分钟得到想要的活性细胞!

一起看 NK 细胞分选方案与数据~在细胞分选中,阴选通常是指对非目的细胞进行标记和去除,来得到目的细胞。避免通过直接的标记目的细胞(比如使用表面特异性抗体标记),从而来减少细胞活化可能。因此,阴选方法的优势在于可以保持目的细胞未受刺激的原始状态,分选速度快。不过相对阳选而言纯度稍低,而且需要事先对原始样品的细胞组分有所了解,准备相应的标记抗体。阴选的优势与劣势本文将大家分享一种新的阴选方法和相关数据,利用 Strep-Tac ...
来源:德国IBALifesciences
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MHC I STREPTAMERS® 检测与分离抗原特异性 (CD8+ T) 细胞

​通过 TCR 与 MHC 多肽复合物间的特异性识别作用,可以对抗原特异性 T 细胞进行检测和分离。然而,当 MHC 多肽复合物为单体状态时,其与 T 细胞的结合并不稳定。若将其四聚体化后,其与 TCR 的结合可保持在一个稳定的状态,成为检测的工具。德国 IBA Lifesciences 研发的 MHC I STREPTAMERS®技术,利用了这一特点,将传统的链霉亲和素改进为 Strep-Tactin®,搭配荧光标记或纳米磁珠,与多聚化的低亲和力MHC I-Streps 形成复合体,实现了对抗 ...
来源:德国IBALifesciences
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多重磁珠阳选方法

1.分选原理源自德国 IBALifesciences 的多重磁珠阳选,选后细胞无试剂残留(即 label-free)的特性,非常适用于分选一些需要用多种 marker 才能准确鉴定的细胞,如 Tcm,Tn,Treg 细胞。假如现在我们想用 CD8+CD62L+CD45RA- 这几个 marker来分选 Tcm 细胞,首先我们可以通过磁珠法阳选先得到 CD8+的细胞,将分选得到的细胞上结合的磁珠等分选试剂去除后,再分选出 CD62L+ 的细胞,这样获得到CD62L+CD8 + 的高纯度 T 细 ...
来源:德国IBALifesciences
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免疫亲和层析细胞分选的技术原理

​免疫亲和层析法常用于蛋白质等生物大分子的纯化。但你是否想过,一根亲和层析柱子也能用来进行细胞分选,而且还不使用高亲和力抗体?在细胞分选中,我们常常利用免疫识别特性来进行,比如流式分选 (FACS)和免疫磁分选 (MACS)。免疫细胞的划分是依据表面标志 CD 分子,可以被抗体识别。比如针对 CD4 + T 细胞这一特定类群,表面含有 CD45、CD3 和 CD4 标记。而表达 CD4 就是辅助性 T 细胞的特征。由此而来,免疫磁分选利用特定抗体偶联磁珠来捕获细胞。细胞与磁珠 ...
来源:德国IBALifesciences
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