手把手教您做肾纤维化(RF)大鼠模型

• 原型物种人
• 来源单侧输尿管结扎致肾纤维化
• 模式动物品系SPF级Wistar大鼠，健康，雄性，体重为180g~200g
• 实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。
• 实验周期7d，14d，21d，28d
• 建模方法1.术前一晚禁食，自由饮水。
  2.称量大鼠，腹腔注射水合氯醛（15%）350mg/kg麻醉，剃毛固定后用碘酒及酒精擦拭手术区域。
  3.在上腹中线偏左约3-4mm剪开腹壁，手术组分离出左肾输尿管。
  4.在靠近肾下极处结扎并分离输尿管，然后双结扎，在2个结扎中间剪断输尿管，逐层缝合肌层及腹壁，酒精清洁缝合处。待大鼠清醒后，将其放回洁净笼具后放回饲养室饲养，定期观察大鼠状态及死亡情况并做好记录。
  5.置于加热垫至其苏醒。假手术组不结扎输尿管，其余步骤相同。
  6.术后三天连续注射青霉素20万单位/天防止感染。
  注意事项：
  1 分离输尿管时注意不要损伤肾脏
  2 注意清理伤口，防止感染。
  3.取下肾脏后要剥离肾表面的结缔组织薄膜。
• 应用疾病模型

模型评价

1. 蛋白尿含量、尿NAG活性测定 模型组术后2周、4周的24h尿蛋白含量以及尿酶NAG活性比正常组和假手术组明显上升。
2. 血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量测定 手术4周后，模型组血清Scr和BUN含量相对于正常组和假手术组有稳定的升高。

组织病理学

术后取左肾于固定，依次脱水、透明、石蜡包埋、切片。做HE染色及Masson染色，光镜观察肾小球、肾小管-间质的病理变化及炎性细胞浸润情况。可见模型组小鼠的肾间质出现炎症细胞浸润，肾小管上皮细胞萎缩、刷状缘消失、肾小管管腔扩张呈囊状，管腔塌陷，间质明显增宽，间质内可见大量炎性细胞浸润，伴有较多的成纤维细胞增生。并随时间的延长炎症细胞浸润加重，小管上皮细胞扁平、脱落，肾小管萎缩、扩张加重，甚至塌陷、消失，胶原纤维增生，间质纤维化加重 。

统计学分析

应用SPSS软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x ±ｓ）表示，采用ｔ检验，组间比较采用单因素方差分析，P<0.05表示有显著差异。