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讲师介绍

方文静
北纳生物菌种技术专员,负责菌株的培养基、活化与传代、菌株的保藏、污染和菌株推荐,为收到菌株之后的处理以及培养等操作。

视频介绍

传代是细胞培养最基本的操作,也是最容易出问题的环节。下面,北纳生物技术老师为大家演示了贴壁细胞的传代操作流程。欢迎点击视频进行观看!

操作步骤
1.贴壁细胞密度达到80%,即可进行传代,拍照,记录细胞状态
2.培养皿表面消毒后,转移至生物安全柜中,去除培养皿中培养液,加入12mlPBS,轻轻摇晃培养皿清洗细胞,随后吸除PBS清洗液。
3.将2ml胰酶加入培养皿中,完全覆盖细胞,置于显微镜下观察(期间禁止摇晃培养皿),当细胞刚开始脱落时,立即转移至生物安全柜中,除去大部分胰酶,剩余约0.5ml胰酶,转移至培养箱内继续消化,每30秒肉眼观察细胞状态,至细胞成流沙状完全脱落,转移至生物安全柜中,加入12ml完全培养基,终止消化。
4.将终止消化后的细胞悬液吹打均匀,按照适当比例分装至培养皿中,并做好标记,加入完全培养基,最后转移至二氧化碳培养箱中进行培养。
贴壁细胞如何传代?你学会了吗?如需更详细的技术指导可在下方留言或直接发送邮件至info@bnbio.com,我们会第一时间为您解答,感谢您的支持!