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视频介绍
- 原型物种人
- 来源脂多糖（LPS）介导的急性肺损伤
- 模式动物品系Wistar大鼠，SPF级，雄性，体重：180g~220g
- 实验分组随机分组：对照组，模型组，阳性药物组，受试药物组(三个剂量梯度组)，15只每组
- 实验周期24hours
- 建模方法将大鼠放入固定盒中，用酒精檫拭大鼠尾静脉后，按压住尾静脉1/3处，注射器进针后回抽有血后注入LPS溶液（溶于生理盐水，给药剂量10mg/kg），从而建立内毒素性急性肺损伤大鼠模型。正常对照组的大鼠做同样的操作，但向尾静脉注射等体积的生理盐水。
- 应用用于急性肺炎发病机制研究和相关药物筛选
模型评价
1.肺损伤后的大体观察：
肺损伤后有肉眼可见肺部大面积出血渗出，可以直观的反映肺损伤程度。
2.肺的湿/干重比：
肺的湿/干重比是反应肺水肿的直接指标，也是反应肺损伤严重程度的敏感指标。建模后，大量液体渗出至肺泡和肺间质，导致肺的重量增大，而肺的干重则不受影响。处死大鼠、剪断气管后取全肺，称湿重，然后将肺置于65℃恒温箱中干燥，24h 后取出称干重，计算肺湿/干重比值。
组织病理学
取左肺4固定，然后将肺组织常规脱水，石蜡包埋，切片（厚度为5μm），HE染色。HE染色肺组织学评价可以直观的反应肺损伤的程度，ALI组织病理学主要表现为肺泡中性粒细胞及红细胞的渗出，肺泡壁透明膜的形成。HE染色后可在低倍镜下观察到整个左肺组织的炎症细胞浸润、水肿以及损伤，评估肺部损伤分布情况；而高倍镜下则可以对肺泡结构进行辨认，对肺损伤程度进行评估和评分。
评分方法：取6个视野进行出血及水肿评分。
0分：没有损伤
1分：<25%的损伤面积
2分：25%~50%的损伤面积
3分：50%~75%的损伤面积
4分：>75%的损伤面积
标志因子水平
左肺叶气管解剖，行支气管插管，预冷的(4度)无菌生理盐水l ml进行支气管肺泡灌洗3次，共3 m1，回收支气管肺泡灌洗液(BALF)至无菌离心管中， 1500 r／min，离心10 min，收集上清液，-80℃保存,使用ELISA试剂盒检测肺泡灌洗液中TNF-a、IL-6和IL-1β等细胞因子的含量。
统计学分析
应用SPSS软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x ±ｓ）表示，采用ｔ检验，组间比较采用单因素方差分析，P<0.05表示有显著差异。
