手把手教您做大鼠颅脑损伤模型

原型物种：人

来源：颅脑打击致颅脑损伤

模式动物品系：SPF级SD大鼠，健康，雄性，体重为180g~200g

实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组，每组15只动物。

实验周期：7d

建模方法

1. 称量大鼠，腹腔麻醉，头部正中剃毛后用碘酒及酒精擦拭手术区域。

2. 沿头部正中稍偏右切开头皮约2cm，钝性分离软组织及骨外膜后暴露颅骨，在人字缝前方2 mm，颅骨中线旁2 mm，用颅骨钻打开直径为4 mm的圆形骨窗，保持硬脑膜完好无损，采用自由落体撞击至脑挫伤的方法。 

3. 用一个40g的金属重物自25cm高处垂直坠落，撞击置在硬脑膜上的圆柱体，致伤冲击力为 1000g·cm造成右顶叶脑挫裂伤，致伤面积为4mm×4mm，致重度脑损伤，然后用骨蜡封闭骨窗，缝合头皮。

4. 待大鼠苏醒后自由饮水，正常饲养。

5. 对照组仅作右顶叶相应部位颅骨开窗，不致伤。

样本采集：

1.血液标本留取：分别于术后24h、72h及7d麻醉大鼠后,于下腔静脉取血2ml，室温静置2h后于4℃ 3000r离心10分钟提取血清，放入-80冰箱冻存。

2.脑组织标本留取：取脑后用溶液固定，蔗糖溶液脱水后，经OCT包埋做冰冻切片，切片10um。

应用：疾病模型

模型评价

1.认知能力的检测 

颅脑损伤后大鼠的神经功能受到损伤，认知能力也会受到影响。术后应用Morris水迷宫对各组大鼠进行为期6天的训练后开始实验，以排除对环境不适应造成的应激影响,剔除不健康的大鼠。

2.细胞凋亡检测

TBI 会产生大量的细胞凋亡。凋亡是发生在多细胞有机体中的一种程序性的细胞死亡过程，其中多种生化过程会引起细胞特征性的改变，特别是形态学上的改变，最后导致细胞死亡。用TUNEL法检测细胞凋亡。

统计学分析

应用SPSS软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x ±ｓ）表示，采用ｔ检验，组间比较采用单因素方差分析，P<0.05表示有显著差异。