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DNA纯化试剂盒(原PCR清洁试剂盒)

  • 价  格: ¥150
  • 品  牌: simgen
  • 货  号: 2101050
  • 保存条件: 室温(15-25℃)
  • 试用规格: 5次
  • 供  应  商: 杭州新捷生物科技有限公司/杭州新景生物试剂开发有限公司
  • 英  文  名: DNA Purification Kit
  • 产  地: 中国
  • 保  质  期: 2年
在线询问 已有 2 人申请试用
杭州新捷生物科技有限公司
商家诚信度:
成立时间:2007
入驻丁香通年限:12年
商家等级:普通客户
产品信息完整度:84.0%
联系人:徐先生

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邮件:technical@simgen.cn

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* 试用品 DNA纯化试剂盒(原PCR清洁试剂盒) (2 人申请)
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试用说明

试用申请时间: 2019年09月01日— 2019年09月14日 1. 运费:卖家承担运费
2. 发货时间:申请试用结束后一周内统一发货3. 申请要求:每个产品,每个客户仅申请试用一个
4. 其他说明:试用后提交试用反馈报告

产品详情

规格: 50次制备 产品价格: ¥150.0


适用于从含有杂质的DNA溶液中回收100bp-10kb的DNA。

·10-15分钟(三个步骤)内即可完成DNA的清洁回收。

·最高可以达到95%的回收效率。

·核酸纯化柱无须平衡液处理,可最大吸附10 μg DNA。

·溶液中所含的pH指示剂可直观地判断溶液中DNA与硅胶膜的最适宜结合条件。

·起始样品:酶反应体系或者含有杂质(比如盐份和酚/氯亻方残留、糖原或多糖残留、蛋白质残留等)的DNA   溶液。

·可用30-50 μl微量洗脱体积洗脱DNA。
 

·所需仪器:可适合2ml离心管使用的离心机。

 

 

右图:
30 μl 100 bp DNA MarkerSimgen PCR清洁试剂盒清洁后,用30μl Buffer TE洗脱(ABC),与未清洁的DNAMarker50%100%)对照各个片段的回收效率。
1.5% TAE 琼脂糖凝胶

 

 

产品原理:
硅胶膜可在高盐条件下结合DNA,又可在低盐条件下与DNA分离。用于清洁目的的含DNA溶液中的引物、单核苷酸、酶、矿物油、盐离子等杂质因为没有与DNA相似的特性,所以被分离除去。结合在纯化柱上的DNA经洗涤液洗涤后,即可回收到高纯度的DNA。

操作步骤
在需要清洁的DNA溶液中加入结合缓冲液,混匀后加入到核酸纯化柱中,经过离心步骤使DNA结合到纯化柱上,其他杂质则被过滤出去。经清洗液洗涤一次纯化柱上的DNA后,DNA即可被TE溶液洗脱下来。

适用的分子生物学实验
 

 

  • DNA测序
  • 基因芯片分析
  • DNA连接与转化
  • 限制性酶切
  • 标记
  • 微注射
  • PCR
  • 体外转录

 

 

常见问题分析

 

1.     回收不到DNA或者DNA的回收效率低

可能的原因:

1      Buffer WGBuffer WB中未加入无水乙醇,应按比例补加无水乙醇。如果是错误地加入了其他试剂,请向我公司技术部寻求帮助。

2      Buffer WGBuffer WB中错误地加入了70%乙醇。请向我公司技术部寻求帮助。

3      DNA的洗脱效率差。参考第3页柱纯化技术中的第4洗脱DNA内容优化DNA的洗脱方案。

4)将溶液加入到纯化柱前应观察BufferGBuffer P是否保持着原来的橙黄色,如果溶液变为紫红色,必须加入约10 μl 3 M醋酸钠(pH 5.0)使溶液恢复至原来的橙黄色,否则将严重影响DNA结合到纯化柱上。

仅凝胶回收:

5)制作的凝胶从加样孔至DNA泳动方向呈现为一个降低的斜面,DNA在泳动的过程中大量地流失到电泳缓冲液中。制作琼脂糖凝胶时应注意放平制胶槽,并加入足够量的凝胶液。

6)凝胶没有完全被溶解,DNA仍保留在未溶解的凝胶中。在50°C溶胶时每隔2-3分钟请将离心管漩涡振荡数秒以帮助凝胶彻底溶解。

7)在凝胶溶解后的溶液中加入异丙醇出现雾状沉淀。出现该种现象主要是因为凝胶没有被彻底溶解,此时应注意不要省略后续的Bufffer G的洗涤步骤,并且加入BufferG到纯化柱中后室温静置1分钟,以增强对未溶解的凝胶的洗涤效果。

 

2.    回收的DNA生物学活性差

1)  回收的DNA中盐分残留量过高。向纯化柱中加入BuffferWG或者Bufffer WB后,室温静置5分钟后再离心,可最大程度地洗去纯化柱上残留的盐分。

2)  回收的DNA中乙醇残留量过高。注意不可省略高速空离(14000 rpm 离心1分钟)步骤。
使用simgen 纯化试剂盒发表的论文

1. Activity improvement of a regioselective nitrilase from Acidovorax facilis and its application in the production of 1-(cyanocyclohexyl) acetic acid

XH Zhang, ZQ LiuYP Xue, YG Zheng - Process Biochemistry, 2014 - Elsevier
 

2. Improvement of Alcaligenes faecalis nitrilase by gene site saturation mutagenesis and its application in stereospecific biosynthesis of (R)-(−)-mandelic acid

ZQ LiuXH ZhangYP Xue, M Xu… - Journal of agricultural …, 2014 - ACS Publications
 

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