首页 » 试用中心 (当前共有3824件试用产品,130591人申请试用)

Caspase-3分光光度法检测试剂盒-5T

  • 价  格: ¥0.01
  • 保存条件: 室温
  • 试用规格: 5T
  • 产  地: 中国
  • 货  号: WLA047
  • 品  牌: 万类生物
登录后申请
已有 5 人申请试用(待审核)
沈阳万类生物科技有限公司
商家诚信度:
成立时间:2008
入驻丁香通年限:10年
商家等级:金牌客户
产品信息完整度:65.0%
联系人:徐老师

若您通过QQ未能联系到商家,您可以给商家发送站内信,与其取得联系。

电话:400-602-0407

邮件:sales@wanleibio.com

地址:辽宁省沈阳市沈北新区蒲文路18-37号

该商家已通过实名认证
(如实填写将方便商家和您及时联系)
* 试用品 Caspase 3分光光度法检测试剂盒-5T (5 人申请)
*申请理由
登录丁香园账号即可使用多地址管理,马上登录注册
* 电话和Email请至少填写一项

 

试用说明

试用申请时间: 2019年07月05日— 2019年07月17日 1. 运费:不包邮
2. 发货时间:试用结束经电话确认后统一发放试用装
3. 申请要求:每人限申请1个
4. 其他说明:试用规格5T

产品详情

规格: 5T 产品价格: ¥0.01
此产品本次参加试用推广的产品规格为5T,抽取5个试用名额(不包邮)

万类生物自主研发一抗、wb检测试剂盒、凋亡检测试剂盒、分子研究、病理检测等产品,
全部现货,免费申请试用装

申请方式:
微信搜索小程序万类生物狗”或 下载万类生物自主开发 “生物狗APP”。
首次注册可申请2个抗体试用装或试剂盒试用装。
试剂促销:抗体5折 50ul低至450元/支,试剂盒8折,买试剂就送京东卡。

产品名称:Caspase 3分光光度法检测试剂盒(试用规格5T

产品概述:Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用。其中Caspase 3是哺乳动物细胞中研究最多的一个蛋白 , 它与DNA断裂、染色质凝聚和凋亡小体形成有关。Caspase 3在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中 , 没有活性 ; 但在细胞发生凋亡阶段 , 它被激活 , 活化的Caspase 3由两个大亚基和两个小亚基组成 , 裂解相应的胞浆胞核底物 , 最终导致细胞凋亡。
本 试 剂 盒 是 基 于 Caspase 3可 以 催 化 底 物 Ac-DEVD- NA( acetyl-Asp-Glu-Val-Asp -nitroaniline) 产 生 黄 色 的 NA( -nitroaniline) , 从而可以通过测定吸光度来检测Caspase 3的活性。 NA在405nm附近有强吸收。
试剂盒中提供了Caspase 3催化产生的黄色产物 NA , 可以作为定量Caspase 3酶活性的标准品。

操作流程:
一、准备工作:
1. 裂解液溶解后混匀并置于冰浴上备用。
2. 检测缓冲液溶解后混匀并置于冰浴上备用。
二、测定 NA标准曲线:
1. 标准品稀释液的配制 : 按照每0.9ml检测缓冲液加入0.1ml裂解液的比例配制适量的标准品稀释液。
2. 把试剂盒提供的 NA(10mM)用标准品稀释液稀释为0、10、20、50、100和200μM,作为标准品。
3. 每个浓度取100μl用酶标仪进行检测,或取适当量用容量不超过100μl的分光光度检测杯进行检测,测定A405。
4. 每一个标准品的A405减去不含 NA的空白对照的A405计算出实际的因 NA而导致的吸光度,并制作出 NA浓度相当于A405的标
准曲线。
三、样品的收集:
1. 对于悬浮细胞:把没有诱导凋亡的对照样品和诱导凋亡的样品,1000rpm 4℃离心5min收集细胞,小心吸除上清,同时确保尽量没有细胞被吸除,PBS洗涤一次。同前吸尽上清后,按照每200万细胞加入100μl裂解液的比例加入裂解液,重悬沉淀,冰浴裂解15min。下转步骤3-4。
2. 对于贴壁细胞:吸取细胞培养液,备用。用胰酶消化贴壁细胞,并收集至备用的细胞培养液中。1000rpm 4℃离心5min收集细胞 , 小心吸除上清 , 同时确保尽量没有细胞被吸除,同前吸尽上清后,按照每200万细胞加入100μl裂解液的比例加入裂解液,重悬沉淀,冰浴裂解15min。下转步骤3-4。
3. 对于组织样品 : 按照每10mg组织加入100μl裂解液的比例加入裂解液,在冰浴上用玻璃匀浆器匀浆。然后把匀浆液转移到1.5ml离心管中,冰浴再裂解5min。
4. 4℃ 12000rpm离心15min。
5. 把上清转移到冰浴预冷的离心管中。
6. 立即测定Caspase 3的酶活性或-70℃保存样品。同时可以取少量样品用Bradford法测定蛋白浓度,尽量使蛋白浓度达到1-3mg/ml,相当于每10μl待测样品中含有10-30μg蛋白。如果细胞较小,可以适当增加细胞的用量。
四、Caspase 3酶活性的检测:
1. 取出 NA和适量的Ac-DEVD- NA(2mM),置于冰浴上备用。
2. 如下设置反应体系:
                 
注 : ①在设置反应体系时先加检测缓冲液 , 再加待测样品 , 适当混匀 , 注意避免在混匀时产生气泡。随后再加入10μlAc-DEVD- NA(2mM)。
 ②在测定组织样本时,可以加大样本量,一般为2-4倍。
3. 加入Ac-DEVD- NA(2mM)后混匀,注意避免在混匀时产生气泡。37℃孵育2-4h。发现颜色变化比较明显时即可测定A405。如果颜色变化不明显,可以适当延长孵育时间,甚至可以孵育过夜。
4. 样品的A405扣除空白对照的A405,即为样品中Caspase 3催化产生的 NA产生的吸光度。通过同步骤二中获得的标准曲线的对比就可以计算出样品中催化产生了多少量的 NA。


详情请致电咨询:400-602-0407(转2号键)或登录公司官网 www.wanleibio.cn

 
资料下载: Caspase 3分光光度法检测试剂盒WLA047.pdf 附件下载 (下载2 次)
更多 › 促销公告
促销时间:2019-07-11 - 2019-09-15

西宝生物携众多知名品牌Jackson 、wako、APSC、Lumiprobe、abcam、Bioporto、Ludger、Laysan等与你一起开启假期暑“价”预购,豪礼相送活动。时不可待,快快参与进来。活动时间:2019年7月15日至2019年9月15日

促销时间:2019-07-10 - 2019-08-31

凡购买500ml优级或标准级胎牛血清1瓶,或者爱必信全线血清产品订单满2000,以下礼品即可任选其一

促销时间:2019-07-03 - 2019-12-31

上海武昊生物科技有限公司2019年9月9日15岁生日,自2019年7月1日至2019年12月31日,现货产品优惠促销,每月9日为优惠日,譬如criver & Charles.river (endosafe)30ML水 12瓶/盒 跳楼价1750元/盒 每个单位限购2盒。现货产品售完,促销自动结束。