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总RNA提取试剂盒(配合TRIZOL使用)

  • 价  格: ¥970
  • 品  牌: 天漠生物
  • 货  号: TR205-50
  • 供  应  商: 天漠科技
  • 试用规格: 50次
  • 英  文  名: TIANMO BIOTECH
  • 产  地: 北京
  • 保  质  期: 1年
  • 保存条件: 室温
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已有 40 人申请试用(待审核)
北京天漠科技开发有限公司
商家诚信度:
成立时间:2006
入驻丁香通年限:8年
商家等级:金牌客户
产品信息完整度:61.0%
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* 试用品 总RNA提取试剂盒(配合TRIZOL使用) (40 人申请)
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试用说明

试用申请时间: 2018年10月08日— 2018年12月31日 1. 运费:包邮
2. 发货时间:尽快发货
3. 申请要求:申请理由越充分,信息越全,通过几率越高

产品详情

规格: 50次 产品价格: ¥970.0

 RNA提取试剂盒(配合TRIZOL使用)
 Catalog No. TR205-50    (50次反应)                 
 
                    TR205-200   (200次反应)              
 Highlights

 
  • 适用于从细胞,组织,酵母菌,植物,细菌或生物液体(任何TRIZOL或类似产品可以裂解的样品)中提取到总RNA(含microRNA
  • 无需进行相分离,无需使用氯仿,无需沉淀过程。
  • 提取到的RNA不含DNA,并可应用于Q-PCR,高通量测序等实验。
  • 整个过程仅需10分钟。
 
产品组成:

 
试剂盒组成 保存 50 200
RNA洗涤液1 室温 50 ml 200 ml
RNA洗涤液2 室温                  10 ml                                    40 ml
第一次使用前按说明加指定量乙醇
RNase-free H2O 室温    
2号柱 室温 50 200
收集管(2ml 室温 50 200
 

特性:
 
  1. 样品来源:TRIZOL等类似试剂裂解的样品。
  2. 样品范围:≥17核苷酸。
  3. RNA纯度:高质量的RNA可应用于高通量测序等敏感的下游实验。
  4. RNA结合量:每个柱子可最多结合50ugRNA
 
试剂制备
RNA洗涤液2  在使用之前一定要配好,添加好乙醇后在试剂瓶上做好标记!!!
添加40ml无水乙醇到10ml RNA洗涤液
 
 
操作步骤:
 
整个操作步骤是由2个步骤组成:(I)样品裂解匀浆(I I)样品纯化
 
(I)               样品裂解匀浆
此步骤主要参考TRIZOL等类似裂解试剂说明书的裂解液用量,以下给出我公司提供的可完美替换TRIZOLTRIcom试剂用量作为参考。
a.组织
动物组织:每30~50mg组织加1mlTRIcom
植物组织:每50~100mg组织加1mlTRIcom
b. 单层生长的细胞
单层贴壁细胞的收集(收集细胞数量请不要超过1×107 ):可直接在培养容器中裂解(容器体积不超过10 cm2 ),或者使用胰蛋白酶处理后离心收集细胞沉淀。(在摇瓶中培养的单层贴壁细胞通常采用胰蛋白酶处理的方法)。
1) 直接裂解法: 直接在培养板中加入RNApure裂解细胞,每10 cm2 面积加入1 ml TRIcom。用 取样器吹打几次。 2) 胰蛋白酶处理法:确定细胞数量,吸除培养基,用PBS洗涤细胞,吸除PBS,向细胞中加入含 0.1-0.25%胰蛋白酶的PBS 处理细胞,当细胞脱离容器壁时,加入含有血清的培养基失活胰 蛋白酶,将细胞溶液转移至RNase-free 的离心管中,300×g 离心5 分钟,收集细胞沉淀,仔 细吸除所有上清。去除液体培养基后,直接往培养板中加入RNA裂解液溶解细胞,并用移液枪轻轻吹打混匀。依据细胞的数量来决定所需的RNA裂解液量(105 细胞以内加100ul, 106 细胞加300ul)。
c. 悬浮生长的细胞
离心沉淀细胞(≤500 x g),完全去除上清后用RNA裂解液重悬细胞沉淀。可短暂涡旋振荡。
d. 细胞悬液:离心取细胞。每5×106107 动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加入1 ml TRIcom。加入TRIcom前不要洗涤细胞,以免降解mRNA。一些酵母和细菌细胞可能需要匀浆仪处理。
e. 血液处理:直接取新鲜的血液,加入3 倍体积TRIcom(推荐0.25ml 全血加入0.75ml TRIcom),充分振荡并
且混匀。
 
其他难裂解的组织,酵母,植物匀浆需要配合蛋白酶K和裂解珠(选配)。
 
 
I I)样品纯化:以下离心力均在10,000-16,000 x g围内进行。
  1. 加入等体积(95-100%)的无水乙醇到上一步TRIZOL裂解液中混匀。
  2. 将上述混合物放入套在收集管上的2号柱子里,离心1分钟。去除滤出液。
  3. 添加400ulRNA洗涤液12号柱子里,离心1分钟。去除滤出液。
  4. 添加700ulRNA洗涤液22号柱子里,离心1分钟。去除滤出液。
  5. 空转2分钟以去除残留的乙醇,以免抑制下游反应。
  6. 取出2号柱,放入一个无RNA酶的离心管中,在吸附膜的中间部位加50μl RNase-free water(事先在 65-70水浴中加热效果更好), 室温放置2分钟, 离心1分钟洗脱RNA
 
 
资料下载: 总RNA快速提取试剂盒(配合TRIZOL使用).pdf 附件下载 (下载11 次)
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