Q-STAT色谱柱对卵白蛋白去磷酸化异构体的分析
磷酸化异构体的分析在生物大分子表征中是非常重要的。高分辨率、非多孔型阴离子交换色谱柱TSKgel Q-STAT 非常适合这样的异构体分析。本数据中介绍了TSKgel Q-STAT 分析检测碱性磷酸酶处理后的卵白蛋白去磷酸化异构体的应用。
色谱条件
色谱柱 : TSKgel Q-STAT (4.6mmI.D. x 10cm)
流动相 :
A ; 20mmol/L Tris-HCl (pH8.0)
B ; 20mmol/L Tris-HCl + 1mol/L NaCl (pH8.0)
梯度 :
0min 0% B
15min 25% B
15.01min 100% B
20min 100% B
20.01min 0% B
25min 0% B
流速 : 1.0mL/min
检测 : UV (280nm)
温度 : 25℃
进样体积 : 30μL
样品浓度 :1g/L
样品 :卵白蛋白
液相色谱仪 : Agilent 1120 Compact LC (gradient auto system)
操作程序 :
在0.75mL 的卵白蛋白样品(1g/L in 20mmol/L Tris-HCl pH8.0)中加入3uL 的碱性磷酸酶(来自牛肠，2500U/mg,
25.88g/L)，然后在37℃下孵化1 小时。