CTD 中具有平滑肌样细胞特征的 CD16+ 的减少
目前世界有着诸多关于肾脏慢性移植功能障碍（CTD）与持续性的免疫炎症最终导致组织重塑（包括肝内动脉中新内膜的形成）的案例。研究表明，受体来源的α-SMA +平滑肌样细胞存在于异源移植肾脏 CTD 中。含有骨髓细胞的人体 PBMC（外周血单个核细胞）在体外α-SMA +具有分化能力，但是原始细胞的表型是未知的。
本研究旨在发现包含细胞与平滑肌样细胞的单细胞亚群的分化能力，是否肾移植受体 CTD 的单核细胞亚群会发生变化。实验中，以 CD14、CD16 的表达为基础分选健康对照组的单核细胞亚群，研究骨髓间质标记物α-SMA 和 SM22α的基因表达水平。
CD14+/CD16++显示对比增加的α-SMA 和 SM22αmRNA 表达水平与 CD14++/ CD16-得到增加的分化潜能接近于平滑肌样细胞。流式细胞仪结果显示非 CTD 移植患者的 CD14+ /CD16 ++比例减少，而且 CTD 患者的减少比例更高。为了确定 CD14+/CD16 ++单核细胞和体外α-SMA +细胞生长潜力之间的关联性，健康对照组和 CTD 移植受体，非 CTD 移植受体的 PBMC 在指定条件下培养，最终确定其显著相关性（P = 0.0002，r= 0.62）。双染色的α-SMA 和 CD16 显示 CTD 患者肾脏移植中α-SMA + CD16 +细胞的存在，即使数量很低。
数据结果表明，相比于 CD14++CD16-，平滑肌样细胞相关基因的 CD14+CD16++表达增加。CTD 肾移植患者的单核细胞亚群减少，可能是由于移植中的选择性迁移的结果。
在对细胞的定量分析与α-SMA 的表达表现测定时，利用奥地利 TissueGnostics 公司 Tissue FAXS 显微镜成像系统，TissueQuest 软件分析系统。
图像获取部分：
Fig.5，肾脏移植中荧光染色的 CD16 与α-SMA 的联合表达。（A）人体脾脏中 CD16/CD68, CD68/α-SMA 和 CD16/α-SMA 的双重荧光标记。其中 (B) CD16/CD68, (C) CD16/CD68 , (D) CD16/α-SMA。每项中上行 non-Tx 代表非移植人类肾脏，下行 IF/TA 代表肾脏移植。（D）中箭头指向圈出区域 CD16+α-SMA+双阳性细胞。
Fig 3 肾脏移植受体和健康对照组中单细胞亚群特征。（A）散点图中对细胞进行正向回溯。得到细胞亚群的数量（1）总活细胞数量（2）单细胞数（3）淋巴细胞（B）健康对照组，CTD 肾脏移植受体和非 CTD 肾脏移植受体中活细胞 CD14+频率。（C）PBMC 中 CD14 和 CD16 表达类型。区域 2 中的数据。（D）健康对照组与肾脏移植受体的单细胞亚群的频率。
Fig 4 CD16-和 CD16++中标记物的基因表达。（A）PBMC 中 CD14 与 CD16 的表达类型。细胞群做到细胞种类的分选：（1）CD14++/CD16-（2）CD14+/CD16++ (B) 单细胞亚群中的α-SMA 和 SM22α的基因表达。（C）14 天的 PBMC 培养，α-SMA +细胞数与健康对照组和肾脏移植受体中的 CD14+/CD16++ 频率关联 。
