培养神经干细胞和祖细胞的方法

   2019-04-28
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培养神经干细胞和祖细胞(NSCs)的传统方式是使用神经球体系。但是,近年来贴壁单层培养法越来越普遍被应用,并且在进行一些实验(例如,细胞转染1)时,贴壁单层培养法比神经球培养法更适合。有报导称在长期培养中,神经球培养法会得到异质性细胞群落2-4,而与之相反,贴壁条件下培养的 NSCs 在胞外基质中均匀分裂来维持一个相对「更纯的」干细胞群落。 

两种培养体系都有各自的优势;请依据您的科研课题来确实哪种方法更适合。下面的表格对该两种方法进行了对比: 

神经球培养单层贴壁培养
异质性细胞群研究报告称有更少的异质性细胞群2-4
在悬液中形成细胞聚集体单层细胞附着在基质上
无需铺板基质需铺板基质(PDL, Laminin)
因为是 3D 的结构,在神经球中央的细胞可能会缺乏营养物质2D 单层培养的形式使得细胞可以均一地接触到培养基和营养物质
神经球 3D 结构被认为与体内神经性生态龛相似2D 单层培养体系使得细胞可以与胞外基质接触并在平底塑料皿上培养
长期培养下会较多促进神经胶质细胞的分化研究报导称长期培养下会较少促进神经胶质细胞的分化
神经球可以用多种方法解离(研磨法,酶消化法,化学解离法)单层细胞可用酶消化法解离(胰蛋白酶或者 ACCUTASE™)


尽管我们的 NeuroCult™  扩增培养基最初是用于支持 NSCs 以神经球悬浮培养的方法进行扩增,但也与贴壁培养体系完全兼容。这一点非常重要且很方便,因为在同一个培养基配方中,可以直接对比在不同的培养体系中所产生的 NSCs 的功能性特征。这两种培养体系都能够支持具有自我更新和向多谱系分化的细胞群的分离。对于在 NeuroCult™ 培养基中使用以上两种方法培养小鼠 NSCs 的对比数据,可查阅在 2010 年 SFN 会议上发表的海报 。 

请查看 STEMCELL Technologies 的官方网站,以了解更多有关人和小鼠的 NeuroCult™ 扩增培养基,包括使用神经球方法或贴壁单层培养法扩增 NSCs 的实验步骤等信息(请查看 Technical Resources 栏下面的操作手册):

• NeuroCult™ 扩增培养基(小鼠)
• NeuroCult™ NS-A 扩增培养基(人)

欲获取更多信息,请参见简短综述:神经干细胞。如有任何问题,请与我们通过电话/邮件联系:400 885 9050 / info.cn@stemcell.com。 

参考文献

1. Theus MH, et al. Curr Protoc Stem Cell Biol. 2012 March; Chapter 2, Unit 2D.8

2. Conti L, Cattaneo E. Nature Reviews 11: 176-187, 2010

3. Contil L, et al. PLoS Biol 3: e283, 2005

4. Pollard SM, et al. Cereb Cortex 16 Suppl, 1L i112-i120, 2006

编辑: z翟某某    来源:丁香园

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