EasySep™ 细胞分选

——简单快捷的无柱细胞分选

EasySep™ 是一种强大的免疫磁珠细胞分选平台，它结合了单克隆抗体的特异性和无柱磁珠分选平台的简便性，能够快速、简单地分离出高纯度的细胞群，且可立即用于下游应用。这一强大且用途广泛的免疫磁珠细胞分选平台可用于正选、负选或去除细胞，适用于包括脾脏细胞、淋巴结、外周血单个核细胞、全血、脐带血、骨髓和白细胞单采术样本。可在短至 8 分钟内从各种物种中分选出细胞，包括人、大鼠、非人灵长类、小鼠、兔子、牛和猪。

EasySep™ 工作原理

通过使用对表面抗原具有特异性的抗体复合物，经标记的细胞可被去除（负选），也可被分选（正选）。抗体复合物可将目标细胞与磁珠相连接。当样本被置于 EasySep™ 磁极中，经标记的细胞在磁场的作用下将被吸附于试管壁上。未经标记的细胞则可被轻松倾倒或吸取到一个新的试管中，而被磁珠标记的细胞则保留在试管中。

EasySep™ 的优势

◆ 简单、快捷。短至 8 分钟，简单倾倒即可分离未经标记的细胞。
◆ 高纯度。可达 99% 的细胞纯度，且回收率高。
◆ 温和。可获得大量活性较高、功能良好的细胞，无需分离柱或洗脱。
◆ 用途广泛。可从几乎任何样本来源分选细胞，包括全血和 Leuko Paks。

图 1. 细胞分选操作时长
使用 EasySep™ 分离不同的细胞所需的时间（以分钟计）

图 2. 通过 EasySep™ 技术分选的免疫细胞具有高活率
使用 EasySep™ 正选或负选试剂盒从处理过的白细胞单采术样本或外周血样本中分离免疫细胞。用细胞活率染料 7-AAD 和合适的细胞表面标记物对分选前后的样本进行染色，然后通过流式细胞仪测定。相比于起始样本，使用 EasySep™ 分选的细胞活率没有显著的降低。数据以平均值±标准误差显示，n = 3 – 7。

图 3. 使用 EasySep™ 分离的人 T 细胞显示出一定的激活状态
使用 EasySep™ 和基于分选柱的竞品从外周血单核细胞（PBMCs）中负选或正选人 T 细胞。分离的 T 细胞在有和没有抗-CD3/CD28 刺激的培养基中进行培养，分别在第 0 天和第 3 天测定其 CD25 的表达。（A）在第 0 天，分离的 T 细胞表达与未处理的 PBMC 中 CD3+ 细胞相似水平的 CD25。（B）在第 3 天，在没有刺激的情况下细胞显示未激活状态，而被刺激的细胞上检测到激活标志物 CD25 的表达。数据以平均值±标准误差显示，n = 3。

图 4. 使用 EasySep™ 分离的人单核细胞在激活后适当地进行分化和成熟
使用 EasySep™ 或竞品产品分离人单核细胞，然后对其进行培养并分化为成熟的树突状细胞（DCs）。在第 0 天，对来自于白细胞单采术样本的细胞进行铺板，2 小时后挑选出贴壁的单核细胞。将没有贴壁的细胞冲洗掉，贴壁的细胞在培养基中培养 7 天。在第 5 天，将成熟化添加物分别加入到细胞（成熟的树突状细胞）或不加入到细胞（未成熟的树突状细胞）中培养两天。通过流式细胞仪来测定未成熟及成熟的树突状细胞中 CD80、CD83 和 CD86 的表达。在第 7 天，细胞表达了成熟的树突状细胞标志物 CD80、CD83 和 CD86。

图 5. 与基于分选柱的技术相比，使用 EasySep™ 进行人 T 细胞分选，可得到与之相当或更好的纯度和回收率
使用 EasySep™ 或者基于有柱分选的竞品对 T 细胞进行负选或者正选。相比于竞品分选系统，通过 EasySep™ 分选的纯度（A）和回收率（B）相当甚至更好。数据以平均值±标准误差显示，n = 3。

图 6. 与基于分选柱的技术相比，使用 EasySep™ 进行小鼠 CD11b+ 细胞分选，可得到与之相当或更好的纯度和回收率
使用 EasySep™ 或者基于有柱分选的竞品从小鼠脾脏正选 CD11b+ 细胞。竞品按照其标准步骤或他们可选的「高纯度」步骤（推荐两次过柱）进行操作。结果显示 EasySep™ 分选得到的细胞纯度（A）和回收率（B）相当或更好的。数据以平均值±标准误差显示，n = 4 - 6。

EasySep™ 磁极

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编辑： z翟某某    来源：丁香园