应用实例12:多波长细胞分类计数(Multi Wavelength Cell Scoring)
在药物筛选过程中,常常需要对细胞内的特异性标记进行分析。当细胞内有多种特异性标记物时,确切分析每一种Marker在细胞内分布和表达的情况时,就会使分析过程变得异常的困难和繁琐,需要很多的时间和人力。MWCS就是针对多种细胞内Marker定量分析的一种解决方法,该分析模块能够检测、定量分析和计算多达7中Marker在细胞内的分布情况,该方法操作简单,对于细胞的处理简单。多达7中的Marker可为胞核或胞浆内的任意Marker,无需特定试剂盒,分析后能够获得如细胞数量、各种Marker阳性和阴性细胞的数量和比例、各种Marker在细胞内的荧光总强度、平均强度,及Marker在细胞内分布的面积等。
细胞经Hochest 33342和FITC标记的微管蛋白抗体标记后,放入ImageXpress Micro中移20X成像,经MWCS分析,可见软件准确辨认细胞核细胞的边缘(左下图),其中绿色细胞为细胞面积大于某个特定阈值(用户设定)的细胞,灰色细胞为细胞面积小于特定阈值的细胞。软件能够得到每个细胞的多个参数(右下图),包括细胞的大小、面积等,及每个细胞内FITC的荧光强度。