ReadyBlot™10X快速蛋白转印缓冲液

优点
专利配方，大大缩短了转印的时间，同时，又保留了蛋白的完整性，使得蛋白转印过程中不发生降解或者变性。完全转印大约只需要10分钟。
• 转印速度快：与传统的转印缓冲液相比，时间自90分钟-4小时缩短到15分钟
• 便捷：适用于原有的设备
• 绿色经济：ReadyBlotTM只在转印过程中需要，海绵或者转印膜的浸泡，可以使用用过的跑胶缓冲液或者转印缓冲液来完成。除了几片转印用的膜和纸，不需要浪费其他的东西。
• 使用简单：只要按照说明书操作即可。
• 转膜效率：100%转移分子量6-240KD的蛋白
• 通用性：适用于任何的胶，转印系统和膜

使用方法
ReadyBlotTM转印缓冲液是一种专利配方，能够大大缩短转印时间，减少蛋白的降解或者变性。ReadyBlotTM有两种形式，一种是液体形式，一种是已经做好的含有海绵垫的形式。这种缓冲液可以与任何材质的转印膜匹配（PVDF，消化纤维，尼龙膜……）
1. 工作液准备
i. 用1L量筒量取100ml 10×ReadyBlotTM储备液。
ii. 加入200ml甲醇或者95%的乙醇
iii. 加入700ml去离子水或者蒸馏水，混匀

2. 湿转印法准备
i. 在缓冲液中浸泡4片厚的转印用纸片和一片转印海绵
ii. 如果用PVDF膜，则将其浸泡在甲醇或者乙醇中
iii. 将膜转移到快速转移缓冲液中
iv. 将胶拆下来，并在蒸馏水中浸泡2分钟
v. 准备转印三明治，如右图
打开转印夹子，阴极一面朝向自己
铺上两层转印用纸片（不要产生气泡）
铺上胶，并用缓冲液打湿
铺上转印膜，赶走所有的气泡，并用缓冲液打湿
再加上两层转印用纸片，不要产生气泡
铺上一层打湿的海绵垫，将转印夹子夹好
放入到转印槽
加入转印缓冲液开始转印，请按照生产商推荐条件操作

3. 半干转印法准备
i. 在缓冲液中浸泡4片厚的转印用纸片和一片转印海绵
在Invitrogen XCell II™ Blot Module中是1-4组转印，相应减少海绵的数量
ii. 如果用PVDF膜，则将其浸泡在甲醇或者乙醇中
iii. 将膜转移到快速转移缓冲液中
iv. 将胶拆下来，并在蒸馏水中浸泡2分钟
v. 准备转印三明治，如右图
打开转印装置，阴极一面朝向自己
铺上两层浸湿的海绵（不要产生气泡）
铺上两层转印用纸片（不要产生气泡）
铺上胶，并用缓冲液打湿
铺上转印膜，赶走所有的气泡，并用缓冲液打湿
再加上两层转印用纸片，不要产生气泡
铺上两层打湿的海绵垫，不要产生气泡
重复加入转印三明治
将转印装置关好看，所有的海绵压在一起
请按照生产商推荐条件操作

4. 电转移条件
我们推荐使用恒定电流
6%-12%的胶最佳条件
*这条件是1mm胶的最佳条件，跟胶的具体组成和厚度有关。调整转印的条件时，根据预染蛋白Marker的条带是否已经完全转移到膜上老调整。
通过加大或者减小电流来调整，而不是调整时间
电流 最小转印时间*
330 mA
400 mA 15-20 min
10-15 min

保存方法及有效期
室温保存5年

转印图

编辑： snail    来源：丁香园