小鼠焦虑模型的建立

小鼠焦虑模型成功建立的一个重要方面就是让小鼠产生焦虑心理，那如何让小鼠产生焦虑心理呢？云克隆公司采用了高架十字迷宫系统（elevated plus-maze test，EPM）。高架十字迷宫具有一对开臂和一对闭臂，啮齿类动物由于嗜暗性会倾向于在闭臂中活动，但出于好奇心和探究性又会在开臂中活动。该系统利用动物对新异环境的探究特性和对高悬敞开臂的恐惧形成矛盾冲突行为来考察动物的焦虑状态。高架十字迷宫被广泛应用于焦虑研究。

那又该如何判断焦虑模型是否建立成功呢？研究发现，当机体内缺乏 gABA 时，会产生焦虑、不安、疲倦、忧虑等情绪。谷氨酸（Glu）是中枢神经系统内含量最高，作用最广泛的兴奋性氨基酸，涉及脑内的很多重要生理功能。因此，脑中 gABA 和 Glu 的表达情况可作为判断的标准之一。

1. 实验动物：SPF 级健康 ICR 小鼠，雄性，8 周，体重（25±2）g。

2. 实验主要仪器: 高架十字迷宫系统。

3. 实验分组

A 组：空白组，10 只。B 组：给药组，10 只，地西泮，按 2 mg/kg/天。

4. 主要试剂

γ-氨基丁酸（gABA）检测试剂盒：Cloud-Clone Corp. 货号 CEA900 Ge    

谷氨酸（Glu）检测试剂盒：Cloud-Clone Corp. 货号 CES122 Ge  

地西泮片 

5. 建模方法

给药组灌胃给予相应剂量的地西泮片，空白组给予相同体积蒸馏水，每天上午、下午各一次，连续灌胃 7 d，每次灌胃量根据分组按照 50ul/10 g 体重。第 8 天上午继续灌胃给药一次，灌胃 40 min 后进行高架十字迷宫检测，于末次给药前 8 h 禁食。将小鼠从中央格面向闭合臂放入迷宫，记录 5 min 内小鼠的活动情况。

6. 模型的评价

6.1 动物行为学观察：进入开放臂次数、开放臂停留时间、进入闭合臂次数、闭合臂停留时间。进入开放臂次数及停留时间与大鼠的焦虑情绪成负相关，进入开放臂次数越少，停留时间越短，说明老鼠的焦虑情绪越严重。

6.2 检测脑中 gABA 和 Glu 的表达：给药组 gABA 和 Glu 含量均高于空白组。

编辑： dxy_8hxjask7    来源：丁香园