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CheKine™ 可溶性酸性转化酶(S-AI)活性检测试剂盒(微量法)
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可溶性酸性转化酶(S-AI)活性检测试剂盒,在线咨询享折扣!

一、产品检测原理

蔗糖是植物光合作用的主要终产物,也是植物体内碳水化合物长距离运输与储存的核心形式。蔗糖转化酶(Invertase,Ivr,EC 3.2.1.26)催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代谢的关键酶之一。根据最适pH的不同,高等植物Ivr可分为酸性转化酶(Acid Invertase,AI)和中性转化酶(Neutral Invertase,NI)两种类型。其中,酸性转化酶的最适pH为3–5,根据亚细胞定位又可分为可溶性酸性转化酶(Soluble Acid Invertase,S-AI)和细胞壁不溶性酸性转化酶(Bound Acid Invertase,B-AI)。S-AI主要存在于细胞液泡或自由空间中,最适pH为4.5–5.0,通过降解液泡中蔗糖,调节液泡中蔗糖的利用和果实内糖类的积累,对果实甜度形成、细胞渗透调节及源库关系建立具有重要调控作用。
CheKine™ 可溶性酸性转化酶(S-AI)活性检测试剂盒(微量法)基于经典的3,5-二硝基水杨酸(DNS)显色比色法原理设计。在该试剂盒中,S-AI在酸性条件下催化蔗糖发生水解反应,生成等摩尔的果糖和葡萄糖。生成的还原糖(葡萄糖和果糖)在碱性加热条件下与DNS试剂发生氧化还原反应,DNS被还原为3-氨基-5-硝基水杨酸,生成棕红色氨基化合物。该有色产物在510 nm处具有特征吸收峰,且在一定浓度范围内,吸光度值与还原糖的生成量呈良好的线性关系。通过测定反应体系在510 nm处吸光度的增加速率,并与葡萄糖标准品建立的标准曲线进行比对,即可定量计算出样本中S-AI的酶活性。该方法操作简便、显色稳定、重复性好,适用于植物组织样本中S-AI活性的快速测定。

二、产品成分属性

本试剂盒包含以下核心组分:Extraction Buffer(提取缓冲液,用于植物组织的匀浆和粗酶液提取,维持S-AI的催化活性并稳定酶蛋白结构)、Reagent I(反应缓冲液,提供酸性反应环境,维持S-AI的最适催化pH)、Reagent II(底物溶液,含蔗糖等底物,经优化浓度确保酶促反应在零级动力学范围内进行)、Reagent III(DNS显色液,与还原糖反应生成棕红色氨基化合物,显色灵敏且稳定)、Standard(标准品,葡萄糖标准溶液,用于建立标准曲线,确保定量结果的准确性)。各组分经过精密配制和严格质检,DNS显色液经过优化配比,确保显色反应的灵敏度和稳定性。提取缓冲液经过优化,能够有效释放液泡中的S-AI并保持其催化活性。

三、产品规格

项目 内容
货号 KTB2292
产品中文名称 CheKine™ 可溶性酸性转化酶(S-AI)活性检测试剂盒(微量法)
产品英文名称 CheKine™ Micro Soluble Acid Invertase (S-AI) Activity Assay Kit
检测方法 比色法(DNS法)
检测波长 510 nm
样本类型 植物组织
试剂盒组分 Extraction Buffer、Reagent I、Reagent II、Reagent III、Standard
保存条件 4℃避光保存
有效期 6个月

四、产品优势特点

专门针对植物样本优化:试剂盒针对植物组织的特殊性进行优化设计,提取缓冲液能够有效释放液泡中的S-AI并保持其催化活性,结果准确可靠。
检测原理经典可靠:基于DNS比色法,该方法在蔗糖转化酶活性检测中应用成熟,通过测定还原糖生成速率间接反映S-AI活性,结果具有高度的可比性和可重复性。
微量检测设计:采用微量法体系,适配96孔微孔板或微量玻璃比色皿,大幅减少样本和试剂消耗,适合高通量植物样本检测和大规模实验筛选。
显色反应灵敏稳定:棕红色氨基化合物在510 nm处的特征吸收峰稳定,检测信号强,显色结果直观,标准曲线线性关系良好,便于酶标仪或分光光度计精确定量。
配套标准品完善:提供葡萄糖标准品用于建立标准曲线,包含详细的样品制备和结果计算方法,方便用户快速获得可靠的定量数据。
操作标准化程度高:试剂盒提供标准化的操作流程和详细的样品制备方法,实验步骤清晰明了,配合常规分光光度计或酶标仪即可完成检测,无需特殊设备。

五、产品应用领域

果实品质与甜度研究:S-AI是调控果实糖积累的关键酶。该试剂盒可用于研究不同品种、成熟度及采后贮藏条件下果实S-AI活性的变化规律,为品质评价和采后保鲜提供数据支持。
植物蔗糖代谢与碳分配研究:S-AI催化蔗糖水解为单糖,是碳分配的重要节点。该试剂盒可用于研究不同光照、温度和CO₂浓度条件下植物S-AI活性的变化,探索光合产物的分配和转运机制。
作物品质改良与育种:S-AI活性直接影响果实、块茎等农产品的甜度和风味品质。该试剂盒可用于研究作物发育过程中S-AI活性的变化规律,筛选高糖品种。
植物抗逆与逆境生理研究:S-AI活性受干旱、盐胁迫、低温等逆境条件的影响。该试剂盒可用于研究逆境条件下植物蔗糖代谢的变化,评估植物的抗逆性强弱。
源库关系调控研究:S-AI在源器官和库器官中的活性差异决定了碳源的分配效率。该试剂盒可用于研究不同基因型或栽培措施对源库关系的调控效应。
转基因植物代谢研究:该试剂盒可用于转基因植物中蔗糖代谢相关基因功能验证,评估基因改造对植物S-AI活性和糖积累的影响。

六、储存与运输要求

本试剂盒需在4℃避光条件下保存,有效期为6个月。运输过程中采用蓝冰冰袋冷链运输,确保试剂在运输途中的低温稳定性。收到货后请立即将各组分按照说明书要求存放于4℃避光环境中。DNS显色液对光敏感,操作过程中请避光。不同批次、不同厂家的组分请勿混用,以免导致结果异常。推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在4小时内完成样品解冻。实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。正式测定之前建议选择2–3个预期差异大的样本做预测定,以确定最佳样本用量和反应条件。
本产品仅供科研研究使用,不适用于人类或临床诊断。
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