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细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(离心柱式)
¥489 - 869

细胞凋亡 DNA Ladder 抽提试剂盒(离心柱式),夏日福利价!

细胞凋亡 DNA Ladder 抽提试剂盒(离心柱式)
DNA Ladder 即 DNA 阶梯状条带,是细胞凋亡的经典生化金标准之一。细胞凋亡启动后,内源性核酸内切酶被激活,特异性切割核小体之间的连接区 DNA,产生长度为 180-200bp 及其整倍数的 DNA 片段,琼脂糖凝胶电泳后呈现特征性阶梯状条带,是判定细胞凋亡的核心依据。传统抽提法操作繁琐、易造成小片段 DNA 丢失,且试剂具有毒性。Abbkine KTA1101 细胞凋亡 DNA Ladder 抽提试剂盒采用离心柱硅胶膜纯化技术,可高效富集凋亡细胞的小片段 DNA,操作简便、安全性高,适合批量样本的凋亡 DNA 提取。

一、产品检测原理

本试剂盒基于硅胶膜离心柱的核酸吸附纯化原理,结合细胞裂解与酶解步骤,实现凋亡 DNA Ladder 的高效提取。首先通过裂解液裂解细胞,释放细胞内的基因组 DNA 与凋亡片段化 DNA;加入蛋白酶 K 降解细胞内的蛋白质,包括与 DNA 结合的组蛋白等核蛋白,释放游离核酸;随后加入 RNase A 降解样本中的 RNA,排除 RNA 干扰。
 
调整缓冲液盐浓度与 pH 后,将混合液转移至硅胶膜离心柱中,硅胶膜在高盐环境下可特异性吸附核酸分子,而蛋白、多糖、代谢杂质等则随流出液被去除;经过两次洗涤液洗涤,进一步去除残留的盐离子与杂质;最后用低盐洗脱缓冲液将吸附在硅胶膜上的 DNA 洗脱下来。该方法可有效回收 180-200bp 的小片段凋亡 DNA,同时也能保留大片段基因组 DNA,提取的 DNA 纯度高,可直接用于琼脂糖凝胶电泳、PCR 等后续实验。

二、产品成分属性

试剂盒包含 9 种核心组分,均经过严格的无酶、无核酸污染质控:
  1. Lysis Buffer A:细胞裂解缓冲液,可高效裂解细胞膜与核膜,释放细胞内核酸,同时保护 DNA 不被非特异性降解。
  2. Lysis Buffer B:辅助裂解与调节缓冲液,优化裂解体系的盐浓度与 pH,提升后续硅胶膜对 DNA 的吸附效率。
  3. Wash Buffer A:第一次洗涤缓冲液,用于去除吸附柱中残留的蛋白、盐离子与杂质,提升 DNA 纯度。
  4. Wash Buffer B:第二次洗涤缓冲液,进一步去除残留的有机溶剂与盐类,保证洗脱的 DNA 无杂质干扰,适合后续电泳实验。
  5. Elution Buffer:洗脱缓冲液,低盐 Tris 缓冲体系,pH 经过优化,可高效洗脱硅胶膜上吸附的 DNA,同时保证 DNA 的长期稳定性。
  6. Spin Column:硅胶膜离心柱,采用优质硅胶膜材质,对小片段 DNA 吸附效率高,回收率稳定,无核酸酶污染。
  7. Collection Tube:配套收集管,材质洁净无酶,用于收集废液与洗脱产物。
  8. RNase A:高纯度核糖核酸酶,可高效降解样本中的 RNA,排除 RNA 对后续电泳检测的干扰。
  9. Proteinase K:高活性蛋白酶 K,可高效降解细胞蛋白与核酸结合蛋白,提升 DNA 的释放效率与纯度。

三、产品规格

  • 货号:KTA1101
  • 产品全称:细胞凋亡 DNA Ladder 抽提试剂盒(离心柱式)
  • 包装规格:50 T,可完成 50 份细胞样本的凋亡 DNA 提取
  • 产品售价:¥489
  • 适用样本:培养细胞(贴壁细胞、悬浮细胞)
  • 货期:现货,次日发货
  • 有效期:按各组分标签提示分开存储,自发货之日起有效期 12 个月

四、产品优势特点

第一,小片段 DNA 回收率高,针对凋亡特征性的 180-200bp 小片段 DNA 优化了硅胶膜吸附配方与提取流程,相比传统抽提法显著减少小片段 DNA 丢失,能更清晰地呈现 DNA Ladder 条带,检测灵敏度更高。
 
第二,操作简便安全,无需使用酚等有毒有机溶剂,避免实验人员接触有害试剂,实验流程标准化,离心柱式操作简单易上手,新手也能快速获得高质量 DNA,适合批量样本处理。
 
第三,DNA 纯度高,通过蛋白酶 K 与 RNase A 双重酶解,结合两次洗涤步骤,可有效去除蛋白、RNA、多糖、代谢杂质等,提取的 DNA OD260/280 比值稳定在 1.8 左右,无杂质干扰,可直接用于电泳、PCR 等后续实验。
 
第四,样本兼容性好,适用于贴壁细胞、悬浮细胞等多种细胞样本,也可用于少量组织样本的凋亡 DNA 提取,满足不同实验设计的需求。
 
第五,学术认可度高,本产品已被 SCI 期刊收录的研究论文引用,方法学可靠性得到学术领域验证,提取的 DNA 样本可直接用于论文发表。

五、产品应用领域

  1. 细胞凋亡检测与验证:作为凋亡检测的经典金标准方法,验证细胞凋亡的发生,结合 Annexin V 流式检测、Caspase 活性检测等方法,多维度确认细胞凋亡状态。
  2. 抗肿瘤药物筛选:检测候选药物处理后肿瘤细胞的 DNA Ladder 形成情况,评价药物诱导凋亡的能力,筛选高效促凋亡抗肿瘤化合物,分析药物的作用机制。
  3. 发育生物学研究:研究胚胎发育、组织分化过程中细胞凋亡的时空分布,分析程序性细胞死亡在发育过程中的调控功能。
  4. 毒理学与环境科学:检测环境污染物、重金属、农药等处理后细胞的凋亡情况,评价毒物的遗传毒性与细胞毒性,为环境风险评估提供实验依据。
  5. 神经生物学研究:研究神经退行性疾病模型中神经元的凋亡情况,分析疾病发生发展的分子机制,评价神经保护药物的干预效果。

六、储存与运输要求

  1. 运输条件:采用蓝冰冰袋低温运输,全程避免剧烈震荡,防止试剂漏液。收到试剂盒后请立即检查包装完整性,若出现试剂漏液等异常情况,请及时联系供应商处理。
  2. 储存条件:按各组分标签提示分开存储,整体自发货之日起有效期 12 个月。其中蛋白酶 K、RNase A 需置于 - 20℃保存,其余缓冲液与离心柱可置于室温或 4℃保存,避免反复冻融。
  3. 使用注意事项:推荐使用新鲜制备的细胞样本,若暂不实验,样本可置于 - 80℃保存数周,室温解冻后需在 4 小时内完成提取,避免 DNA 降解;实验开始前请将所有试剂恢复至室温,保证反应效率;操作过程中需佩戴手套,避免外源核酸酶污染样本;不同批次、不同厂家的试剂不可混用;洗涤液使用前需按说明书加入无水乙醇。
本产品仅供科研研究使用,不适用于人类或临床诊断。
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