LysA Universal PARylation检测试剂盒促销中，品质不打折，库存不等待

在细胞应激响应与DNA损伤修复研究中，PARylation（多聚ADP-核糖化）作为一种关键的可逆翻译后修饰，正日益受到广泛关注。由PARP家族（PAR聚合酶）和PARG（PAR糖水解酶）共同调控的PAR稳态，在炎症、缺血、卒中及癌症等多种疾病进程中发挥着重要作用。针对PARP的抑制剂已在肿瘤治疗中获得成功，而PARG的过度表达与乳腺癌的发生发展密切相关。因此，准确、便捷地检测细胞内的总PARylation水平，对于基础研究及药物开发具有重要意义。由艾美捷代理BPS Bioscience研发的LysA Universal PARylation检测试剂盒（货号：82123）正是为此设计的一套完整的酶联免疫吸附测定（ELISA）解决方案。

图1：LysA通用PAR化检测工作流程图。

使用抗标准杆数（PAR）抗体包被96孔板。将细胞裂解液加入包被的孔中，使细胞裂解液中的标准杆数（PAR化蛋白）被抗体捕获。随后与抗标准杆数一抗和HRP标记的二抗孵育。加入化学发光HRP底物后产生发光信号，该信号与细胞提取物中标准杆数的含量直接相关。

 

一、核心原理与检测性能

该试剂盒采用夹心ELISA原理，专用于定量检测细胞提取物中的总多聚ADP-核糖化水平。其独特之处在于提供了PAR标准品，用户可据此建立标准曲线，实现绝对定量。检测范围经验证在100 pM至20 nM PARylation区间内呈良好线性关系，确保了实验结果的精确性与可重复性。

试剂盒采用96孔板形式，包含实验所需的全部核心组分：特异性抗体、封闭缓冲液、检测试剂以及作为质控的细胞裂解物。这种“开箱即用”的设计极大简化了实验流程，减少了因自行配制试剂引入的批次间差异。

 

二、适用场景与主要应用

该试剂盒主要面向以下三类核心应用场景：

 

1. 培养细胞中总PAR水平的定量分析：研究人员可直接处理贴壁或悬浮培养细胞，裂解后利用试剂盒测定不同处理条件下细胞内PARylation的总体变化。

2. PARP或PARG抑制剂在细胞中的IC50测定：在药物筛选过程中，通过梯度处理候选化合物，可便捷计算出抑制剂的半数抑制浓度，为构效关系研究提供关键数据。

3. 细胞模型中PARP或PARG抑制剂的药效验证：除单纯的活性测定外，该试剂盒还可用于评估抑制剂在真实细胞环境中的作用效果，验证其是否如预期般降低PARylation水平，从而关联到细胞表型变化。

 

三、操作流程与所需配套材料

尽管试剂盒提供了核心检测试剂，用户仍需自行准备以下关键辅助材料以获得最佳结果：

改良RIPA裂解液（中强度）（BPS Bioscience 82126）：用于充分提取细胞蛋白，同时维持PAR修饰的稳定性。

LysA蛋白酶抑制剂混合物试剂盒（BPS Bioscience 82199）：防止蛋白降解，保证检测准确性。

ADP-核糖化循环抑制剂混合物（82130）或完全ADP-核糖化循环抑制剂混合物（82539）：这两项尤其重要——由于细胞内存在动态的PAR合成与降解循环，加入抑制剂可“冻结”取样瞬间的PARylation真实水平，避免在样品处理过程中因内源性PARG或ARH3活性导致信号衰减。

基本操作流程包括：细胞接种与药物处理 → 裂解液（含抑制剂）裂解 → 蛋白定量 → 加入预包被板孵育 → 检测抗体结合 → 化学发光底物显色 → 酶标仪读数 → 依据标准曲线计算PAR浓度。

 

四、存储稳定性与运输条件

试剂盒采用-80°C超低温运输，所有组分在收货后按指示存储条件下，自收货之日起6个月内保持最佳性能。用户需特别注意：反复冻融可能降低试剂活性，建议首次解冻后分装保存。

 

五、注意事项与局限性

特异性：该试剂盒仅检测多聚ADP-核糖化（PARylation），无法识别单ADP-核糖化（MARylation）。若研究重点为单修饰，需选择其他专用工具。

线性范围：严格控制在100 pM–20 nM范围内定量。超出该范围的高浓度样本需进行适当稀释后重新测定。

物种兼容性：试剂盒设计基于人源细胞体系，但在模式生物（如小鼠、大鼠）细胞中的交叉反应性需用户自行验证。

 

六、文献参考

Marques M., et al., 2019 Oncogene 38 (12): 2177-2191.

James D. I., et al., 2016 ACS Chem Biol 11 (11): 3179-3190.

Drown B. S., et al., 2018 Cell Chem Bio 25 (12): 1562-1570.