面对检验医学领域新技术、新方法的迅猛发展,作为主流临床实验室的检验科面临哪些机遇和挑战? 随着高新技术的日新月异,新的检测方法和新的项目不断涌现,对我们检验科也提出了更高的要求同时也是巨大的发展机遇。包括质谱分析技术、聚合酶链扩增技术、基因测序等新技术平台与检测手段的出现使我们的检测方法发生了翻天地覆的变化,临床检验不再是简单的三大常规,更多高灵敏度和特异性的检测方法在临床上得以推广运用,甚至使我们能够在分子层面对疾病的本质进行认知,也催生了大量对疾病的分层诊断、预后评估及疗效判断更有价值的新项目。应对此类发展趋势,我们科室以国家重点临床检验专科为契机,相继引进了CellSearch循环肿瘤细胞检测系统、高效液相色谱串联质谱分析仪、基因测序仪、荧光原位杂交仪、高效毛细管电泳仪等先进检测系统,使我们检验科的检测结果与报告在临床诊疗工作中扮演了愈发重要的角色,能够为临床医生提供更全面,更有帮助的临床信息。 中山医院为什么会考虑引进LC-MS/MS检测平台?该方法在临床上的推广应用到底有什么意义? LC-MS/MS方法作为一种新兴的检测平台,已广泛应用于生物医学研究领域。随着技术的不断革新,LC-MS/MS逐渐转向临床实验室检测,为临床内分泌相关疾病诊疗监测提供更具可靠的检测结果。 LC-MS技术相比之前传统检测方法有什么不同或改变?能否举例说明?从技术上讲,LC-MS相比于传统免疫方法,更加准确可靠,特异性和灵敏度更高。质谱检测技术的检测灵敏度能够达到pg/mL的水平,传统方法受制于标准曲线检测限的原因远达不到该水平。同时质谱法是通过被检测物的荷质比进行精确定量的,与传统的免疫学检测方法相比,特异性更好,准确性更高。例如在进行一些激素水平检测时,由于该类物质在人体内浓度都相对较低,且结构相似的物质较多,传统免疫方法和HPLC方法的敏感性和特异性均无法达到检测要求。而相关激素检测在肾上腺肿瘤的鉴别诊断、前列腺癌患者的激素抑制治疗的效果评价、甲状腺肿瘤的根治治疗中的预后判断方面均具有重要价值。比如说临床上诊断嗜铬细胞瘤,传统方法检测的诊断指标包括血和尿儿茶酚胺(CA)、尿香草扁桃酸等,但均缺乏足够的敏感性和特异性,受多种物质及疾病状态的干扰。而近年来研究发现CA在嗜铬细胞内的儿茶酚-O-甲基转移酶的作用下生成变肾上腺素类物质(MNs),血浆MNs的半衰期较CA长,因此血浆游离MNs的诊断性能更加稳定且直接反应肿瘤细胞状态。血浆游离变肾上腺素类物质对嗜铬细胞瘤因其较高的特异性和敏感性,已成为嗜铬细胞瘤诊治导则中的推荐标志物。 目前中山医院检验科使用LC-MS/MS方法主要有哪些方面的检测?他们分别具有怎样的临床应用价值?目前,我们主要使用LC-MS/MS进行激素类物质的检测,包括血浆间甲肾上腺素类物质、甲氧酪胺、尿儿茶酚胺、17羟α孕酮、25羟基维生素D及治疗药物浓度等的相关检测。我们开展的间甲肾上腺素类激素(MNs)包括间甲肾上腺素(MN)和去甲变肾上腺素(NMN),已有临床研究表明多种内分泌代谢性疾病及精神类疾病都会表现出变肾上腺素类激素异常,如嗜铬细胞瘤、神经母细胞瘤、脑梗死、重症肌无力、进行性肌营养不良、心肌梗死、躁狂性精神病,帕金森病、癫痫等疾病等。北美神经内分泌肿瘤协会2010年就嗜铬细胞瘤,副神经细胞瘤,甲状腺髓样瘤在内的三类肿瘤的诊断和治疗发布导则指出,对于不同检测物质在不同样本中的诊断价值方面,血液中MN和NMN水平在所有组合中具有很好的敏感度和特异性。而维生素D是一种类固醇激素,维生素D家族中最重要的是维生素D2和维生素D3。研究表明,佝偻病、骨质疏松、肿瘤、心血管疾病、糖尿病、高血压等疾病都与维生素D缺乏有关。传统免疫学方法检测不能区分维生素D2和维生素D3,会影响结果准确性。当使用LC-MS/MS检测时,首先使用有机溶剂提取血液中的维生素D,之后使用LC-MS/MS系统对复杂的血样进行色谱分离,根据维生素D2和维生素D3不同的分子量进行特异性质谱检测,从而得到血液中维生素D的含量。 LC-MS/MS应用于治疗药物检测,不同检测指标通常应用方法存在一定差异,如何保证在不同时间、不同仪器上的重现性?换句话说,如何保证检测质量? 我们有着严格的实验室管理流程,作为实验室自建项目(LDT),我们科室也制定了相应的LDT规范及质量保证体系。我们对LC-MS/MS的每一种新的方法都进行了相应的性能验证,包括回收率、技术验证等。很多方法都有对应的应用方法和标准品、试剂盒,不同时间、不同仪器上的重现性是有保证的。除此之外,我们也得到厂家工程师专业维护和技术支持,以保证良好运行的检测状态。 您如何看待LC-MS/MS技术的今后发展前景,中山检验在这方面有何相应举措?LC-MS/MS的迅速发展已受到医药、制剂、科研等多个领域的广泛关注。内分泌领域涉及有关LC-MS/MS方法的文献每年增加超过100篇,随着研究数据的积累,相对于免疫学方法和GC-MS,LC-MS/MS优势显露无疑。目前国际上已经先后将许多激素及小分子的质谱检测方法定义为参考测量程序,并作为检测“金标准”应用于临床。我们科室内部近年来也快速建立起了一支基于质谱检测技术平台的高素质人才队伍,注重硬件与软件并进,转化先进的研究和技术成果,为临床提供更加灵敏、准确及可靠的检验信息,提高肾上腺肿瘤、乳腺癌、前列腺癌以及甲状腺肿瘤的诊疗水平。 中山医院检验科率先在国内检验领域采用质谱等先进检验技术,请问有什么体会? 我们一直致力于推进包括质谱技术在内的一些新技术新方法在临床检测工作中的良性发展,将国际上最先进的临床检验技术与中国实际的临床需求相结合,满足临床对于各类内分泌激素、新生儿代谢性疾病、小分子物质等检测诊断的需求,使临床检验更好地支撑临床诊断与治疗,实现疾病的早期发现,早期诊断,以获得更好的治疗效果,节约医疗资源,真正使患者得到更优质的临床诊疗服务。 |