AAV靶向神经研究指南【血清型与启动子选型】

推荐使用血清型AAV- PHP.S、AAV- rh10、AAV9

AAV9是应用广泛的血清型，能穿过血脑屏障，全身注射可感染脊髓运动神经元，对PNS有良好的感染效果^[2]。

AAV- rh10和AAV9效率相似甚至更高，当低剂量注射时，AAV- rh10比AAV9更有效地转导脊髓背侧和下运动神经元^[3]。此外，AAVrh10在骨骼肌组织中具有感觉神经元趋向性，非常适合用于骨痛等相关研究。

AAV- PHP.S由AAV9改进而来，不仅扩散能力强，在外周神经系统中的转导效率也比AAV9更高，且可转导82%的背根神经节、心脏和肠神经元、以及一系列外周器官，尤其适合需要广泛标记PNS的研究^[4]。

AAV5、AAV6、AAV9和AAV- rh10均可以实现对完整小鼠脊髓的有效转导（图2）。其中AAV- rh10对神经元和神经胶质细胞具有更高的趋向性（图3），是在慢性期损伤脊髓中进行基因递送/转移的最合适的血清型^[5]。

图2  AAV1-9和AAV-rh10对完整小鼠脊髓的有效转导

图3  慢性期损伤脊髓中AAV5、AAV6和AAV- rh10的细胞趋向性

AAV- PHP. eB、AAV-PHP. B和AAV- PHP.S由AAV9改造而来，可以实现小鼠脊髓的高效转导，且通过系统注射即可，操作方便。此外鞘内注射后，AAV9变体衣壳AAV-F也能介导非人灵长类动物脊髓中广泛的转基因表达^[6]。

图4  不同AAV血清型静脉注射后横断脊髓切片荧光图^[4]

^{在小鼠中，AAV-DJ在体外和体内都表现出强大的转导效率，在靶向脊髓的同时去靶向肝和肾方面更优越。}

图5  靶向脊髓的病毒滴度和荧光素酶转基因转录水平^[7]

^{研究人员通过髓鞘注射AAV2、AAV5、AAV6、AAV8、AAV9、AAV- rh10等六种血清型，发现在脊髓背角AAV9和AAV- rh10血清型转导效率最高，且对背根神经节的感染效率也显著高于其它血清型。}

^{图6  不同AAV血清型感染脊髓效果对比}

^{此外，衣壳工程化改造带来了像AAV.CPP.16这样的新型变体，其在啮齿类和灵长类动物（食蟹猴）中均显示出优于AAV9的血脑屏障穿透能力和脊髓转导效率，为靶向CNS提供了更有力的工具[8]。}