缓冲液参考中心

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· 常见生物缓冲液的pH范围
· Tris缓冲液的制备 - pH vs. 温度
· 磷酸盐缓冲液的制备 - 0.2M溶液
· 柠檬酸 - 磷酸氢二钠缓冲液的配置，pH2.6 - 7.6
· 柠檬酸 - 柠檬酸钠缓冲液的配置，pH3.0 - 6.2
· 乙酸钠 - 醋酸缓冲液的配置，pH3.7 - 5.6
· 磷酸氢二钠 - 磷酸二氢钠缓冲液的配置，pH5.8 - 8.0 （25℃）
· 咪唑 - 盐酸盐缓冲液的配置，pH6.2 - 7.8 （25℃）
· 碳酸钠 - 碳酸氢钠缓冲液的配置，pH6.2 - 7.8 （25℃）
· 缓冲液配置公式

选择正确的缓冲液
基于酸碱性、解离常数（衡量溶液酸碱性、浓度以及温度的系数）、规格、纯度以及精确的应用领域可帮助您选择一款合适的缓冲液。以下表格通过pH与pKa数据的参考，为您提供一些常用缓冲液的配置方案。

缓冲液级别
为满足各种形式的实验需求，我们提供不同纯度与杂质含量的缓冲液试剂。目前有7种不同级别的试剂可以满足基本的实验室需求、帮助建立药品配方与生产、检测痕量金属含量以及生产指定纯度级别的材料。

常用生物缓冲的有效pH范围（25℃, 0.1M)

名称	有效的pH缓冲范围	pKa（20℃）	pKa（25℃）	pKa（37℃）	试剂级	更优级别
MES	5.5-6.7	6.16	6.1	5.97	M105074	M274288
Bis-Tris	5.8-7.2	n/a	6.5	6.36	B105639	B113072
ADA	6.0-7.2	6.65	6.59	6.46	A108964	A108965
ACES	6.1-7.5	6.88	6.78	6.54	A100327	A100328
PIPES	6.1-7.5	6.8	6.76	6.66	P105090	P105092
					P105093	P105091
MOPSO	6.2-7.6	n/a	6.9	6.75	M113008	n/a
Bis-Tris-Propane	6.3-9.5	n/a	6.8，9.0	n/a	B299299	n/a
					B105640
BES	6.4-7.8	7.17	7.09	6.9	B105116	B105117
					B105115
MOPS	6.5-7.9	7.28	7.2	7.02	M105135	M274252
					M105133
TES	6.8-9.2	7.5	7.4	7.16	T105113	T105114
HEPES	6.8-8.2	7.55	7.48	7.31	H109407	H109408
					H109406
DIPSO	7.0-8.2	n/a	7.6	7.35	B113022	n/a
MOBS	6.9-8.3	n/a	7.6	n/a	M120630	n/a
TAPSO	7.0-8.2	n/a	7.6	7.39	T113029	n/a
Tris	7.0-9.0	8.2	8.06	7.72	T110600	T110602
						T110599
						T110598
						T274227
						T274250
						T110601
HEPPSO	7.1-8.5	n/a	7.8	6.66	H113003	n/a
POPSO	7.2-8.5	n/a	7.8	7.63	P105272	n/a
TEA	7.3-8.3	n/a	7.8	n/a	T108151	n/a
					T108154
EPPS	7.3-8.7	n/a	8	n/a	H110899	H110901
					H110900
Tricine	7.4-8.8	8.16	8.05	7.8	T100351	T118067
					T100350
Gly-gGly	7.5-8.9	n/a	8.2	n/a	G105429	G119491
						G119492
						G119491
Bicine	7.6-9.0	8.35	8.26	8.04	B110905	B110906
HEPBS	7.6-9.0	n/a	8.3	n/a	H113002	n/a
TAPS	7.7-9.1	8.49	8.4	8.18	T108961	T108963
					T108962
AMPD	7.8-9.7	n/a	8.8	n/a	A106026	n/a
TABS	8.2-9.6	n/a	8.9	n/a	T329718	n/a
AMPSO	8.3-9.7	n/a	9	9.1	A120640	n/a
CHES	8.6-10.0	9.55	9.49	9.36	C110897	n/a
					C110898
CAPSO	8.9-10.3	n/a	9.6	9.43	C105213	n/a
AMP	9.0-10.5	n/a	9.7	n/a	A140833	n/a
					A100592
CAPS	9.7-11.1	10.56	10.4	10.02	C105209	n/a
					C105210
CABS	10.0-11.4	n/a	10.7	n/a	C120628	n/a

 

TRIS缓冲液配置指导 - pH vs.温度

磷酸盐缓冲液配置指导 - 0.2M 溶液  


醋酸-磷酸氢二钠缓冲液配置，pH 2.6-7.6
一水柠檬酸，C6H8O7 • H2O，MW 210.14；0.1M 含量为21.01 g/L。磷酸氢二钠，MW 141.98； 0.2M 含量为28.40 g/L，或者磷酸氢二钠二水合物，MW 178.05；0.2M 含量为35.61 g/L。

当X mL 0.1M-醋酸 和Y mL 0.2M-磷酸氢二钠混合时

醋酸-柠檬酸钠缓冲液配置，PH 3.0-6.2
一水柠檬酸，C6H8O7 • H2O，MW 210.14；0.1M 含量为21.01 g/L。柠檬酸三钠二水合物，C6H5O7Na3•2H2O，MW 294.12；0.1M 含量为29.41 g/L。 

当X mL 0.1M-醋酸 和Y mL 0.1M-柠檬酸三钠混合时


醋酸钠-醋酸缓冲液配置，PH 3.7 - 5.6
醋酸钠，CH3COONa • 3H2O，MW 136.09；0.2M 含量为27.22 g/L。

X mL 0.2M-NaOAc 和Y mL 0.2M-HOAc 混合时

 
碳酸氢二钠-碳酸二氢钠缓冲液配置，PH 5.8-8.0  25℃
Na2HPO4 • 2H2O, MW 178.05；0.2M 含量为35.61 g/L。Na2HPO4 • 12H2O，MW 358.22； 0.2M 含量为71.64 g/L。NaH2PO4 • H2O，MW 138.01；0.2M 含量为27.6 g/L。NaH2PO4 • 2H2O，MW 156.03；0.2M 含量为31.21 g/L。 

X mL 0.2M-磷酸氢二钠，Y mL 0.2M-磷酸二氢钠；用水稀释至100mL
 
咪唑-HCl 缓冲液配置，PH 6.2 - 7.8  25℃
咪唑，C3H4N2，MW 68.08

25mL 0.2M-咪唑（13.62 g/L），X mL 0.2M-HCl，用水稀释至100mL
 
碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液配置，PH 9.2 -10.8
Na2CO3 • 10H2O，MW 286.2；0.1M 含量为28.62 g/L。NaHCO3， MW 84.0；0.1M 含量为8.40 g/L。

X mL 0.1M-碳酸钠和Y mL 0.1M-碳酸氢钠混合时
 
缓冲液制备的配方与方式 质量分数（w/v)
（缓冲液所需百分比/100）× 最终缓冲液体积（mL）=  最初所需原料的质量（g）

配置摩尔浓度
所需的物质的量浓度 × 分子量 × 溶液最终体积（L) = 所需的质量（g）

亨德森-哈塞尔巴尔赫方程

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参考文献
1. Dawson R, Elliot D, Elliot W, Jones KM. 1986. Data for Biochemical Research. 3rd ed.. Oxford Science Publ..