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Exo Tracker 是一种可对外泌体进行示踪的新型荧光标记染料。Exo Tracker 分子本身没有荧光,只有当其与外泌体特异性结合后,分子构象发生改变,扭曲的分子内电荷转移效应受到抑制,复合物才能被激发产生荧光,从而使与其结合的外泌体被标记。此外,Exo Tracker 分子中含有特殊性质的半花菁基团,可以通过改变其所处环境的 pH 来调控半花菁结构中亚胺基团质子化和去质子化的转变,进而实现对 Exo Tracker 荧光光谱的调控,同时给予了 Exo Tracker 独特的低 pH 耐受性,因此更适用于监测外泌体在受体细胞中的运动轨迹。Exo Tracker 是一种新型的荧光探针分子,可用于超分辨率成像、激光扫描共聚焦成像、流式细胞分析等。Exo Tracker 属于小分子化合物(m/z=537.2604),与外泌体结合后不影响外泌体的大小和结构,保证了外泌体的原始功能和活性。Exo Tracker 无需复杂的多步反应,无需额外的化学修饰,与传统荧光化合物相比,具有操作简单、高灵敏度、高分辨率、高特异性以及生物相容性好等优势。
应用实例: 应用 1:Exo Tracker 在有无外泌体存在下的荧光光谱研究 利用荧光酶标仪分别检测了 Exo Tracker 在有无外泌体存在下在波长 670 nm 处的荧光强度。结果表明 Exo Tracker 未与外泌体结合时荧光很弱,与外泌体结合后荧光显著增强。 Figure 1 Fluorescence spectrum variation of Exo Tracker with or without exosome 应用 2:Exo Tracker 标记外泌体的细胞摄入流式研究 利用流式细胞仪分别检测了三种与 Exo Tracker 标记的外泌体孵育后的细胞的荧光强度。结果表明和与未标记的外泌体孵育的细胞相比,与 Exo Tracker 标记的外泌体孵育的细胞荧光信号明显增强,而添加外泌体内吞抑制剂处理后,细胞的荧光信号就会减弱。 Figure 2 Cell uptake of Exo Tracker labeled exosome detected by flow cytometry 应用 3:酸性环境中 Exo Tracker 标记外泌体的细胞摄入荧光成像研究 利用激光扫描共聚焦成像仪分别检测了酸性条件下新型染料 Exo Tracker 和常规染料 CFDA-SE 在细胞中的荧光强度。结果表明酸性条件下 CFDA-SE 信号微弱,而 Exo Tracker 信号较强。 Figure 3 Confocal image of Exo Tracker/CFDA-SE dual-labeled exosome in cells in acidic condition Scale bar: 50 μm 郑州麦斯凯生物技术开发有限公司引入专利技术生产的 Exo Tracker-外泌体示踪染料,让您拥有外泌体观察的简单快捷工具。更多信息欢迎咨询 0371-55693318,18137377698。 产品组分
使用方法 1,试剂准备:首次使用前将 Buffer 溶液全部添加至 Exo Tracker 母液中,涡旋振荡,充分混匀,制成 Exo Tracker 储备液待用。 2,Exo Tracker 标记: 1)2 μL 的 Exo Tracker 储备液可标记 50 μg 外泌体。使用者根据实验所需外泌体量参照此比例进行使用。如外泌体为 100 μg,则取 4 μL Exo Tracker 进行标记。将 Exo Tracker 与外泌体溶液充分混匀后,室温避光孵育 1 h。 2)孵育完成后,将反应混合液转移到 Amicon-Ultra-0.5ml-10 kDa 超滤管中,PBS 补齐至 400 μL,14000 g,10 min 离心洗涤三次,移除多余 Exo Tracker。无菌 PBS 重悬滤膜截留的 Exo Tracker 标记的外泌体进行后续实验即可。 |