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该种抗体只包含一个重链可变区(VHH)和两个常规的CH2与CH3区,却具有非常好的稳定性,不像人工改造的单链抗体片段(scFv)那样容易相互沾粘,甚至聚集成聚体。更重要的是单独克隆并表达出来的VHH结构具有与原重链抗体相当的结构稳定性以及与抗原的结合活性,是目前已知的可结合目标抗原的最小单位,其分子量只有15KD,也因此被称作纳米抗体。
标准抗体、重链抗体和VHH纳米抗体
纳米抗体的应用:
纳米抗体相对于传统抗体具有众多优势:
纳米抗体诸多方面均优于传统抗体,基于羊驼重链抗体的VHH单域抗体的特殊结构,兼具了传统抗体与小分子药物的优势,几乎完美克服了传统抗体的开发周期长,稳定性较低,保存条件苛刻等缺陷,逐渐成为新一代治疗性生物医药与临床诊断试剂中的新兴力量。相比于常规抗体,纳米抗体的优势有:
Jackson旗下开发的VHH结构域抗体是通过从羊驼血清中高度纯化的羊驼VHH片段来免疫山羊获得的。我们已经证明这些抗体对羊驼和美洲驼都有很强的识别能力。
实验案列:
流式检测案列:
山羊抗羊驼VHH抗体(例如Alexa Fluor®488共轭128-545-230)可用于检测患者细胞上的VHH,而不识别内源性免疫球蛋白G或来自小鼠、兔或大鼠的主要抗体。目前的肿瘤学研究在许多T细胞定向策略中采用了纳米体(VHH)技术来使用(先天性)免疫防御。这包括产生用于招募和激活细胞毒性或γδT细胞的双特异性格式,纳米源嵌合抗原受体(CAR)T细胞,以及开发阻断纳米抗体的免疫检查点(chanier和chames,2019)。修饰性T细胞的特征通常是通过流式细胞术来完成的,这样就可以对表达CAR的细胞进行分类和扩增。
我们使用多克隆羊驼VHH抗人免疫球蛋白G(而不是CAR)来证明128-545-230在流式细胞术中的应用。下面的实验代表淋巴细胞上的门控样本。山羊抗羊驼VHH不识别小鼠抗cd19,只有当VHH抗人免疫球蛋白G存在时才能检测到人免疫球蛋白G。
常用的羊驼和VHH二抗产品列表
备注:☆这些抗体主要与Fc区反应,不建议用于检测VHH抗体(纳米抗体)
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