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冰冻切片的免疫组化染色步骤
2018-06-15 15:26 点击次数:
关键词:
冰冻切片,免疫组化,染色
速冻组织
将组织块平放于软塑料盖或特制小盒内(直径 2 cm),如组织块小可适量加 OCT 包埋剂浸没组织,然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内,当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾,此时小盒保持原位切勿浸入液氮内,大约 10-20 秒组织即迅速冰冻成块。取出组织冰块立即置入-80℃ 冰箱储存备用,或置于恒冷切片机冰冻切片。
冰冻切片 4~8 mm,冰冻切片后如不染色,必须吹干,储存低温冰箱内,或进行短暂预固定后储存冰箱内保存。
室温放置 30 分钟后,入 4℃ 丙酮固定 10 分钟。也可根据需要选择其它的固定方式。
PBS 洗,5 分钟×3。
用 3% 过氧化氢孵育 5~10 分钟,消除内源性过氧化物酶的活性。
PBS 洗,5 分钟×3。
下接石蜡切片免疫组化染色操作步骤(滴加一抗开始)。
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