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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 供应商:
LABLEAD
- CAS号:
0
- 规格:
1L
储运条件:室温
产品组成
| 组分 | 规格 |
| Transfer Buffer | 10 Pouches |
产品简介
转膜缓冲液为白色至类白色速溶颗粒,每袋Transfer Buffer速溶颗粒可配制1L 1×Transfer Buffer 缓冲液,操作简便,使用方便。Transfer Buffer 的主要成分为48mM Tris、39 mM甘氨酸和0.04% SDS。
LABLEAD Transfer Buffer 适用于蛋白质免疫印迹实验(Western Blot)半干法电泳转膜。预混有SDS可适用于大分子量蛋白或疏水性强蛋白。
使用方法
1、量取约600ml的蒸馏水加入烧杯,并放置一个磁性搅拌子于烧杯中。
2、将烧杯置于磁力搅拌器上,慢慢加入1袋Transfer Buffer 速溶颗粒(半干转)的全部内容物,搅拌溶液直至完全溶解。
3、向步骤2的Transfer Buffer溶液(半干转)中加入200ml无水甲醇,再用水定容至1L,即为1×工作液。
注:新配制的1×转膜缓冲液室温可保存2周。
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文献和实验(湿转)25 mM Tris 碱190 mM 甘氨酸20% 甲醇测定 pH,pH 应为约 8.3。必要时进行调节。对于大于 80 kDa 的蛋白质,我们推荐加入最终浓度为 0.1% 的 SDS。转膜缓冲液(半干转)48 mM Tris39 mM 甘氨酸20% 甲醇0.04% SDS封闭缓冲液5% 奶粉或 BSA(牛血清白蛋白)加入 TBST 缓冲液中。混匀并过滤。过滤失败可能导致出现「斑点」,其中微小的黑色颗粒会在显色过程中污染印迹。实验步骤一、样品裂解◇ 制备细胞培养物裂解物1. 将细胞培养皿置于
1、试剂耗材的准备:(1)转膜缓冲液(48 mM Tris-HCl,39 mM 甘氨酸,0.037% SDS,20%甲醇):(2)10 × 丽春红染液:(3)TBS 缓冲液:(4)TBST 缓冲液(含20%Tween20 的TBS 缓冲液):(5)封闭液(含5%脱脂奶粉的TBST 缓冲液):(6)一抗、二抗及抗体稀释液:参照说明书,以封闭液或TBST 进行稀释。(7)底物显色液ECL,4℃ 避光保存,现用现配。(8)显影液和定影液用水稀释10 - 20 倍于铝盒中,可多次使用。室温避光存放
(pH6.8) 1.5 mol/L Tris•HCl(pH8.8) 10% SDS 10% 过硫酸胺(APS) 还原型 5XSDS 上样缓冲液 10X 电泳液缓冲液 10X 转膜缓冲液 1X 转膜缓冲液 10XTBS 缓冲液 1XTBST 缓冲液 封闭缓冲液: 1X TBST含5% w/v 脱脂牛奶或者 1X TBST 含 2%-5% 的牛血清白蛋白(BSA)。 操作步骤 根据待测蛋白分子量大小确定凝胶(分离胶)浓度制胶 上样使用适当的裂解液以及裂解方法裂解贴壁细胞、悬浮细胞或者组织










