FS Mix Direct f

FS^TM TaqMix Direct for tissue

货号	规格
P2071b	1 ml（40次，50 μl体系/次）
P2072b	1 ml×5（200次，50 μl体系/次）

产品组分
P2071b
2×FS^TM Mix Direct for Tissue 1ml 1支
Extraction Solution 10ml 1瓶
Neutralization Solution 1ml 1支
超纯水 1ml 1支

P2072b
2×FS^TM Mix T 1ml 1支×5
Extraction Solution 40ml 1瓶
Neutralization Solution 5ml 1支
超纯水 1ml 1支×5

• 本产品分含体系中包含溴酚蓝、不含溴酚蓝两类。体系中包含溴酚蓝的产品，PCR扩增产物可直接电泳检测。这两类产品的扩增性能无差异。如没特别说明提供体系中包含溴酚蓝的包装。
• 本产品附送PCR标本处理液（P9061/P9062）
• PCR标本处理液包含Extraction Solution 和Extraction Solution

保存条件
-20℃保存2年。
请勿保存于-70℃，防止反复冻融导致酶活降低。

产品说明
FS^TM Mix Direct for tissue是适合组织样本扩增的2×浓缩快速高效PCR预混和溶液，含有FS^TM Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、缓冲液等PCR扩
增必需组分（模板与引物除外）。使用时，仅需在扩增体系中加入简单处理后的样本处理液和引物即可进行PCR，大大简化操作过程，缩短操作时间，
降低污染（加样次数减少）。本产品不用进行繁琐费时费钱的DNA提取，最大限度减少实验误差和交叉污染；结果可靠，经检验与DNA扩增产物无异。
含溴酚蓝染料的PCR产物可直接电泳。
FS^TM Taq DNA 聚合酶 是东盛根据蛋白工程原理，以Taq DNA 聚合酶为基础研发的新型DNA聚合酶。本产品具备类似KOD酶快速扩增能力，延伸速度可达3 kb/min，是普通
Taq DNA 聚合酶的3倍，可缩短一半以上的PCR扩增时间。同时具备普通Taq DNA 聚合酶扩增效率高、适应性广等优点。


产品特点

• 高特异性。
• 样品用量节省。
• 使用方便：无需繁琐的DNA提取过程，仅需简单处理样本即可进行PCR扩增。
• 快速、高效：减少加样步骤，节约时间。
• 可重复：降低污染和加样错误风险

产品用途

• 长链复杂模板PCR扩增
• 高通量、高重复性长链复杂模板PCR扩增

活性定义
一个活性单位（U）指用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在72℃、30 min内，摄入10 nmol全核苷酸所需的酶量。

质量控制
相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染；PCR方法检测无宿主残余DNA，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因；室温放置一周，
扩增活性无明显改变。

应用举例
注：以下反应举例为25 μl标准PCR体系，仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物结构、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。

处理液上清 　　　　　　　　 2μl　　　　　
引物1 （10 μM） 　　　　　　　 　 2 μl
引物2 （10 μM）　　　　　　　　 2 μl
2×FS^TM Mix Direct for Tissue 12.5 μl
超纯水 　　　　　　　 补足至25 μl

PCR反应条件

多数模板的快速扩增条件
94℃ 4 min
94℃ 30 sec
55~68℃ 30 sec 〕 30 Cycles
72℃ 20 sec
72℃ 2 min

1kb简单模板的快速扩增条件
95℃ 3min
95℃ 15 sec
55~68℃ 15 sec 30 Cycles
72℃ 20 sec
72℃ 2 min
注：由于1 kb简单模板的二级结构简单，且长度较短，可同时缩短变性、退火时间至15 s，以实现快速扩增。

注意事项
1 使用本产品时，引物、模板、dNTPs用量跟普通PCR Mix的一样，为实现快速扩增，请尽量选用小体反应体系。
2 退火温度一般为TM-5℃或TM-8℃，稍低的退火温度有利于实现快速扩增。
3 延伸时间视片段长度而定。一般情况，≤500 bp目的片段延伸15 s；500 bp-1 kb目的片段延伸20 s；＞1 kb目的片段，延伸时间 按 20s/kb计算，如1.5 kb目的片段延 伸30 s、3 kb目的片段延伸60 s。
4 FS^TM Taq DNA聚合酶具有脱氧核苷酸转移酶活性，因此在PCR产物3'末端通常会加上一个多余的脱氧腺嘌呤核苷。
5 建议在冰上配置PCR 反应液后，再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR结果。
6 50μl PCR反应体系中模板DNA推荐用量
人类基因组DNA 0.1μg------1μg
λDNA 0.5ng--------5ng
质粒DNA 0.1ng------10ng
大肠杆菌DNA 10ng-----100ng


Q&A
问：使用FS^TM Mix Direct for tissue扩增时是否需要使用快速PCR扩增仪？
答：不需要，使用普通的PCR扩增仪即可。
问：FS^TM MixDirect for tissue的使用与普通Taq Mix 有何不同？
答：使用方法与普通PCR Mix 基本相同，只需注意扩增条件中时间适当缩短。
问：FS^TM Mix Direct for tissue扩增产物是否可用于TA克隆？
答：FS^TM Taq DNA 聚合酶 没有3-5外切酶活性，所以PCR产物末端带 A，可进行TA克隆。
问：FS^TM 系列与KOD系列产品相比有什么区别？
答：KOD有3-5外切酶活性，保真性比较高，但正因为有外切酶活性，容易降解引物及模板，所以其灵敏度及易用性方面不如FS^TM Taq。普通检测及基因诊断很少用到KOD
酶。