通用型全基因组扩增试剂盒

通用型全基因组扩增试剂盒

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  • ¥1980
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  • Z100941
  • 2025年07月08日
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    • 详细信息
    • 技术资料
    • CAS号

      Z100941

    • 供应商

      上海雅吉生物科技有限公司

    • 规格

      25次

    通用型全基因组扩增试剂盒是用于基因组DNA扩增全基因组的试剂盒,可以方便、简单、快速、经济的得到稳定产量的基因组DNA扩增样品。本产品有如下优点:
    1. 基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和超强链取代能力。
    2. 可以扩增基因组达上万倍,具有高产量和高保真性的特点。
    3. 可使用各种来源的样品,包括全血,干血,发根,口腔粘膜刮液培养细胞, 真菌和病毒等。
    4. 操作简便快捷,恒温30℃)反应,无须PCR仪即可实现扩增。
    5. 产物可用于多种后续试验,包括多重PCR、长片断PCR、定量PCR、克隆、 文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析片段差异,
    微卫星差异,SNP,STR)等。
    成 份 编 号 十孔盒包装
    变性液 100941a 62.5 uL
    中和液 100941b 125 uL
    WGA Mix 100941c 250uL
    Phi 29 DNA 聚合酶10U/uL 100941d 12.5uL
    使用手册 100941sc 1 份
     
    自备试剂 超纯水(无 DNA 和 DNase 污染)
    运输及保存 低温运输、-20℃保存, 有效期一年。
    使用方法 本产品适用于纯化好的基因组DNA。

    一、碱变性(碱变性法一般好于热变性法,推荐用户使用)
     
    1. PCR 塑料管中加入不超过 2.5uL 纯化好的基因组DNA 或用量在100pg-100ng之间。如果体积不足2.5uL,则用超纯水补齐。最好同时做 一个不加DNA模板的阴性对照。
    2. 加入等体积2.5μL)变性液,轻柔吹打混匀。
     
    1. 室温放置2-5分钟。
    2. 加入5uLWGA中和液。此时样品总体积为10uL。二、WGA反应
    3. 10uL DNA样品中,加入10 μL WGA Mix,轻柔吹打混合均匀。
    4.  
    5. 加入0.5 uL Phi 29 DNA聚合酶10U/uL)轻柔吹打混合均匀。
    6.  
    7. 30℃保温3-12小时。最好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴,最好在样品管中加入30-50uL石蜡油以防水分蒸发,因      30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁,从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高,WGA三小时即可检测到DNA扩增。
    8. 65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。注:由于phi29 DNA聚合酶DNA外切活性,所以最好将其灭活以免干扰后续反应。
    9. 立即取5-10 uL WGA反应液进行电泳检测扩增效果。

    10. 扩增的DNA可以用于后续试验或当冰箱长期保存
    11. 通用型全基因组扩增试剂盒用本产品扩增 10 ng 纯化好的藻基因组DNA,反应体系为 10 μL,扩增时间为 8 h。 5 μL 样品电泳,第一泳道为 Marker(大片段为 15  Kb,第 2~5 泳道扩增样品的引物浓度分别为 100,200,300,400 μM染料为绿如蓝核酸染料
    12. WGA 原理图圆球表示phi 29DNA 聚合酶
      短蓝线表示随机引物
      棕色线表示新合成的DNA
       

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