包涵体分离缓冲液
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包涵体分离缓冲液

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  • 伊塔生物
  • 国产/进口
  • SY4666
  • 2025年07月16日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      2-8℃

    • 保质期

      1-3年

    • 英文名

      ITTABIO

    • 库存

      35

    • 供应商

      北京伊塔生物科技有限公司

    • CAS号

      125-62-6

    • 规格

      500ml

    包涵体分离缓冲液,包涵体分离缓冲液,包涵体分离缓冲液,货号:SY4666,品牌:伊塔生物,规格:500ml,CAS:126-596-3,纯度≥98%,分子式:C42H72O14,分子量:801.01,溶解性:DMSO,鉴定方法:液相,性状:白色粉末,熔点:194-197℃,密度:1.33g/cm3,保存条件:2-8℃ 避光,运输料件:2-8℃,保质期:3年,产地:中国,类别:生化试剂,库存:23,用途:仅用于科研实验  Phosphodiesterase I 使用方法: 参考官网:ittabio.com ,解决方案:扫一扫微信公众号。
    包涵体分离缓冲液包涵体分离缓冲液
    一.常用贮液与溶液配置方法
    1. 1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。
    2. 1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。
    3. 10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
    4. 10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA酶)于9.5ml水中(为减少变性,
    5. 须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
    6. 1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
    7. 8mol/L乙酸钾(potassium acetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。
    8. 3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。
    9. 0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。
    10. 1mol/L HEPES:将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。
    11. 1mol/L HCl:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
    12. 25mg/ml IPGT:溶解250mg的IPGT(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)于10ml水中,分成小份贮存于-20℃。
    13. 1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl2·6H2O于足量的水中,定容到100ml。
    14. 20mg/ml蛋白酶K(proteinase K):将200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
    15. 10mg/mlRnase(无DNase)(DNase-free RNase):溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中(pH 5.0)。溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。1mol/L的Tris-HCl调pH至7.5,于-20℃贮存。(配制过程中要戴手套)
    16. 10%SDS(十二烷基硫酸钠):称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至1L。
    17. 2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol):溶解36.4g山梨(糖)醇于足量水中使终体积为100ml。
    18. 2.5% X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷):溶解25mg的X-gal于1ml的二甲基甲酰胺(DMF),用铝箔包裹装液管,贮存于-20℃。
    二.电泳缓冲液、染料和凝胶加样液,配置方法
    电泳缓冲液
    50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液
    成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量
    2mol/L Tris碱 1mol/L 乙酸 100 mmol/L EDTA 水  242g 57.1 ml的冰乙酸(17.4 mol/L) 200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0) 补足1L 
    5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液
    成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量
    445 mmol/L Tris碱 445 mmol/L 硼酸盐 10 mmol/L EDTA 水  54g 27.5g 硼酸 20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0) 补足1L 
    染料
    1%溴酚蓝(bromophenol blue)
    加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。
    1%二甲苯青FF(xylene cyanole FF)
    溶解1g二甲苯青FF于足量水中,定容到100ml。
    10mg/ml的溴化乙锭(ethidium bromide)
    小心称取1g溴化乙锭,转移到广口瓶中,加100ml水,用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管,于4℃贮存。
    凝胶上样液(gel loading solutions)
    成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量
    0.15%溴酚蓝 0.15%二甲苯青FF 5 mmol/L EDTA 15%聚蔗糖(400型) 水  1.5ml 1%溴酚蓝 1.5ml 1%二甲苯青FF 100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0) 1.5g 补足到10ml 
    6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)
    成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量
    0.25%溴酚蓝 0.25%二甲苯青FF 15%聚蔗糖(400型) 水  2.5ml 1%溴酚蓝 2.5ml 1%二甲苯青FF 1.5g  补足到10ml 
    6×甘油凝胶上样液(4℃贮存)
    成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量
    0.15%溴酚蓝 0.15%二甲苯青FF 5 mmol/L EDTA 50%甘油 水  1.5ml 1%溴酚蓝 1.5ml 1%二甲苯青FF 100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0) 3ml  3.9ml 
    6×蔗糖凝胶上样液(室温贮存)
    成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量
    0.15%溴酚蓝 0.15%二甲苯青FF 5 mmol/L EDTA 40%聚蔗糖 水  1.5ml 1%溴酚蓝 1.5ml 1%二甲苯青FF 100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0) 4g  补足到10ml 
    10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液(室温贮存)
    成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量
    0.2%溴酚蓝 0.2%二甲苯青FF 200 mmol/L EDTA 0.1%SDS 50%甘油  水  20mg 20mg 4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0) 100ul 10% SDS 5ml 补足到10ml 
    三、常用抗生素配置方法
    1.  氨苄青霉素(ampicillin)(100 mg/ml)
    溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
    2.  羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml)
    溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基
    3.  甲氧西林(methicillin)(100mg/ml)
    溶解1g甲氧西林钠于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
    4.  卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml)
    溶解100mg卡那霉素于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
    5.  氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml)
    溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以12.5ug/ml~25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
    6.  链霉素(streptomycin)(50mg/ml)
    溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
    7.  萘啶酮酸(nalidixic acid)(5mg/ml)
    溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
    8.  四环素(tetracyyline)(10mg/ml)
    溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中,或者将无碱的四环素溶于无水乙醇,定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光,于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
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