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Cell Meter 抗氧化活
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西安百萤生物科技有限公司
Cell Meter 抗氧化活性检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ROS的试剂盒,活性氧(ROS)在细胞信号传导和维持生理细胞代谢中是重要的。 过量的ROS损害细胞成分,这些成分与多种疾病相关,包括癌症,代谢紊乱,神经退行性疾病等。产生抗氧化剂,包括酶,大分子和小分子,以对抗ROS诱导的生物体内的损伤。 体液,组织和细胞中抗氧化活性的定量分析提供了重要的生物信息。 我们的Amplite™比色抗氧化检测试剂盒使用ABTS作为抗氧化活性的比色指示剂,基于观察到抗氧化剂能够阻止ABTS氧化的能力 ABTS +通过辣根过氧化物酶(HRP)和过氧化氢(H2O2)ABTS +,一种可溶性色原,可以在405nm处用分光光度法监测。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 抗氧化活性检测试剂盒。
样品实验方案
简要概述
1.准备样品/ Trolox(10 µL)2.添加HRP(20 µL)3.添加ReadiUse ABTS底物溶液(150 µL)4.在室温下孵育5分钟5.监控405 nm处的吸光度
溶液配制
1.储存溶液配制
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。1.1 辣根过氧化物酶(HRP)储备溶液(2000X):向辣根过氧化物酶(组分A)的小瓶中加入1 mL分析缓冲液(组分B)。
1.2 Trolox标准溶液(100毫米):将100 µL DMSO加到Trolox瓶中(组分D)。
2.标准溶液配制
Trolox标准通过使用稀释因子= 2和高浓度= 1 mM在测定缓冲液(Componenet B)中稀释100 mM Trolox标准溶液来制备Trolox标准溶液。
3.工作溶液配制
将2.5 uL的2000X HRP储备溶液添加到5 mL的测定缓冲液(组分B)中,制成1X HRP工作溶液。
样品操作及实验分析
表1.在透明的96孔微孔板中的Trolox标准品和测试样品的布局。 SD = trolox标准品(SD1-SD7,0.0156至1 mM),BL =空白对照,TS =测试样品。
表2.每个孔的试剂组成
1.根据表1和表1中的布局,准备trolox标准品(SD),空白对照(BL)和测试样品(TS)(如有必要,在测定缓冲液中稀释样品,使抗氧化剂水平与Trolox处于同一范围内),表2。
2.在Trolox标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入20 µL HRP工作溶液,使总体积为30 µL /孔。
3.向每个孔中加入150 µL ReadiUse ABTS底物溶液(组分C),总体积为180 µL /孔。 注意:避免光照,并在聚丙烯容器中使用。
4.在室温下孵育5分钟。 注意:这5分钟的保温时间是一个指导原则。 可以改变孵育时间以获得更合适的吸光度。
5.使用酶标仪读取405 nm处的吸光度。
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