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Z buffer
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一年
上海泽叶生物科技有限公司
2-8℃
瓶
中文名:Z buffer
英文名:Z buffer
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:2-8℃
操作方法:
1.为了得到好的结果,用新鲜的克隆(一般30℃培养2-4天),菌落直径1-3mm。
2.配制Z buffer/X-gal 溶液
3.预先将滤纸放在盛有2.5-5.0ml的Z buffer/X-gal 溶液的培养皿中。
4.用镊子夹取一张干净、干燥的滤纸放在长有菌落的平板上,轻轻用镊子摩擦将滤,帮 助菌落附着在滤纸上。
5.透过滤纸,在三个不同的方位上穿孔(不对称的方位),此方法用于在培养基上确定 滤纸的方向。
6.当滤纸均匀湿润后,用镊子小心将滤纸从培养基上取下,转移到液氮中,浸没在液氮 中10妙。
7.取出液氮中冷冻过的滤纸,室温下融化。
8.小心将滤纸正面朝上,放在第三步预处理的滤纸上,避免在两层滤纸中间产生气泡。
9.将带有两层滤纸的培养皿放于30℃或室温下,定期检查蓝色菌落的出现情况。一般8 小时之内变蓝的可初步定位阳性克隆。
10.在平板上找到与蓝色菌落相对应的菌落,挑相应的蓝色菌落到新的培养基平板 上。
方法改进:
先在一个培养皿中铺一张普通灭菌滤纸,再加2.5-5.0ml Z buffer/X-gal溶液将滤纸润湿;然后将显色滤纸(Whatman 5# 滤纸或Grade 410滤纸)剪成长方形,放在培养皿中,加少量灭菌水润湿,用牙签挑取菌落轻轻在滤纸上划线,直接液氮冷冻10妙钟,取出室温融化,放在预先准备好的滤纸上,避免在两层滤纸间产生气泡。做好标记后, 放在30℃或室温下,定期检查蓝色菌落的出现情况。一般8小时之内变蓝的可初步定位阳性克隆。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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