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X-α-gal溶液 (20mg
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X-α-gal solution
一年
上海泽叶生物科技有限公司
-20
瓶
中文名:X-α-gal溶液 (20mg/ml,过滤除菌)
英文名:X-α-gal solution
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:-20
保存条件:-20 ℃避光储存,未开封有效期12个月。产品说明:
X-α-Gal(5-溴-4-氯-3-吲哚基-α-D-吡喃半乳糖苷)是α-半乳糖苷酶(MEL1)的显色反应底物,更为常见的X-Gal是β-半乳糖苷酶(LacZ)的显色反应底物。α-半乳糖苷酶可水解无色的X-α-Gal底物,并生成蓝色的产物。通过肉眼可见的蓝白斑筛选,可快速而简便的识别阳性克隆。
MEL1是GAL4酵母双杂交系统的一个报告基因,编码外泌型的α-半乳糖苷酶。如果蛋白无互作,报告基因MEL1不表达,菌落呈乳白色;如果蛋白发生互作,报告基因MEL1表达,菌落呈蓝色,亦可根据菌落蓝色深浅,初步判断蛋白互作强度。
X-α-Gal与缺陷型筛选平板同时使用,可有效提高筛选效率,排除假阳性克隆,主要应用于酵母双杂交实验GAL4酵母表达系统中蛋白互做的阳性克隆的检测。也可用于筛选含α-半乳糖苷酶基因细菌菌株;区分肠杆菌科内的不同菌种,以及区分双歧杆菌和乳酸菌;组织化学中用于酶活性的检测等。
母液配制:
X-α-Gal母液(20 mg/mL):取20 mg X-α-Gal溶于1 mL DMF,或等比例放大,过滤除菌。
使用方法:
涂布于预制平板:
1. 用DMF稀释X-α-Gal母液至4 mg/mL。或溶解24 mg X-α-Gal于6 mL DMF,终浓度为4 mg/mL。
2. 涂布200 μL(φ15 cm) 或者100 μL(φ10 cm)X-α-Gal储存液于预制平板上;
3. 置于37 ℃培养箱至液体被吸收(DMF挥发性差,最长可放4小时);
4. 将转化细菌或酵母涂于平板上,于37 ℃或30 ℃培养直至蓝色菌斑出现。
直接加入培养基:
1.将已灭菌固体培养基冷却至50-55 ℃;
2. 100 mL固体培养基加入100-200 μL X-α-Gal母液混匀,快速倒平板。特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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