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MTT溶液(5mg/ml)
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MTT Staining Solution
一年
上海信裕生物科技有限公司
RT
10ml
中文名:MTT溶液(5mg/ml)
英文名:MTT Staining Solution
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:RT
MTT 可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物 formazan,在特定溶剂存在的情况下,可以被完全溶解,然后通过酶标仪可以测定 490nm 波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快,则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。
使用说明:
1. 收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,分于 96 孔板,每孔 180μL,3000-10000 个细胞/孔。(贴壁细胞需用胰蛋白酶消化)
2. 置 37℃、5%CO2 温箱培养使细胞贴壁,培养 6-24 小时。
3. 加入适当浓度的受试化合物,继续培养适当时间。
4. 小心吸去上清,加入 90μL 新鲜培养液,再加入 10μL MTT 溶液,继续培养 4 h。
5. 然后吸掉上清,每孔加入 110μL Formazan 溶解液,置摇床上低速振荡 10 min,使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪 490 nm 处测量各孔的吸光值。
6. 同时设置调零孔(培养基、MTT、 Formazan 溶解液),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解 介质、培养液、MTT、 Formazan 溶解液),每组设定 3 复孔。
注意事项:
1. 由于使用 96 孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发的问题。一方面,由于 96 孔板周围一圈最容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加 PBS,水或培养液;另一方面, 可以把 96 孔板置于靠近培养箱内水源的地方,以缓解蒸发。
2. MTT 溶液为黄色需避光保存,长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时,请勿使用。 Formazan 溶解液结冻或产生沉淀时可以 37℃水浴孵育以促进溶解,并且必须在全部溶解并混匀后使用。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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