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- 神经退行性疾病，阿尔兹海默症，淀粉样斑块
- 2026年03月06日
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杰克森实验室
| 系统命名：B6SJL-Tg(APPSwFlLon,PSEN1*M146L*L286V)6799Vas/Mmjax 普通命名：5XFAD, Tg6799 品系货号：006554 品系来源： 该品系由Northwestern University的Robert Vassar捐赠。 原始参考文献为Oakley H; Cole SL; Logan S; Maus E; Shao P; Craft J; Guillozet-Bongaarts A; Ohno M; Disterhoft J; Van Eldik L; Berry R; Vassar R. 2006. Intraneuronal beta-amyloid aggregates, neurodegeneration, and neuron loss in transgenic mice with five familial Alzheimer's disease mutations: potential factors in amyloid plaque formation. J Neurosci 26(40):10129-40 PubMed: 17021169 MGI: J:112949 品系描述： 这些 5XFAD 转基因小鼠过表达突变的人 APP(695) 以及瑞典型（K670N、M671L）、佛罗里达型 (I716V) 和伦敦型 (V717I) 家族性阿尔兹海默症 (FAD) 突变并携带两个 FAD 突变（M146L 和 L286V）的人 PS1。这两个转基因的表达都由小鼠的神经特异性调控元件 Thy1 启动子调控，以驱动转基因在大脑中的过表达。这一品系的小鼠具有高 APP 表达，与 42 个氨基酸长度的 β-淀粉样蛋白 (Aβ-42) 种类的高负荷和加速积累相关。5XFAD 小鼠几乎只产生 Aβ-42，并快速在大脑中积累。在 C57BL/6 和 SJL 的混合遗传背景下（见 MMRRC 货号 34840），从 1.5 月龄开始可以观察到神经细胞内 aβ-42 蓄积，这一现象刚好发生在 2 月龄开始的淀粉样蛋白沉积和胶质增生之前。在 C57BL/6J 同源遗传背景下（见 MMRRC 货号 34848），MMRRC 观察到的数据显示该表型不如在 C57BL/6 和 SJL 的混合遗传背景下稳定（查看数据）。此外，这些小鼠存在突触标志物蛋白水平降低、p25 水平升高、神经元丧失和 Y-型迷宫测试中的记忆受损。5XFAD 转基因小鼠重现了阿尔兹海默症淀粉样蛋白病理的主要特征，可作为神经元内 Aβ-42 诱导的神经变性和淀粉样斑块形成的模型。半合子小鼠可存活且可繁育。 该品系的视网膜退化等位基因 Pde6brd1 可发生杂合子/野生型分离。 该模型通过在每一代将转基因动物回交至 B6SJL F1 来维持。因此，SJL 遗传背景比例在这些动物的后代中是分离的。需要注意的是，SJL 的 Trem2 等位基因在 17 号染色体上的 48351152 (GRCm38) 位点含有自然发生的变异。这种 C 到 A 的转换导致在第 148 位氨基酸产生终止密码子 S148stop (dbSNP ID: rs107649577 [Ensembl GRCm38.p6])。该变异的预测结果是蛋白截短，从而缺失跨膜螺旋。该杂交产生的小鼠基因型可能为该位点的杂合子、纯合子或野生型。该变异可能对 Trem2 在阿尔兹海默症病理中所起作用的研究有特殊价值。 注：5XFAD 转基因也有在 C57BL/6J 遗传背景下的品系（不携带上述 Trem2 等位基因）（见 MMRRC 货号 34848）。 品系建立：一个转基因设计是将突变的人 β 淀粉样蛋白 (A4) 前体蛋白 (APP) cDNA 序列（修饰后包括 APP K670N/M671L（瑞典型）+ I716V（佛罗里达型）+ V717I（伦敦型）家族性阿尔兹海默症 (FAD) 突变）插入到小鼠 Thy1 基因的 2 号外显子中。另一个转基因设计是将突变的人早老蛋白 1（阿尔兹海默症 3）（PSEN1 或 PS1）cDNA 序列（改变为包括 PS1 M146L + L286V FAD 突变）插入到小鼠 Thy1 基因的 2 号外显子中。两个转基因以等比例混合，共注射到单细胞“C57/B6XSJL”杂交胚胎的原核中。将来自 APP 表达水平很高的首建鼠 (Tg6799) 与 (B6/SJL)F1 小鼠杂交超过 10 代，具有稳定的种系传递和两个转基因的表达，证明这些“5XFAD”小鼠为通过单个转基因繁殖。注意，APP 转基因包含 5' 非翻译区，因此包含可能的白介素-1β 翻译增强子元件。 |
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文献和实验10b基因连接到脂肪组织特异表达的FABP4启动子上，通过常规转基因技术获得转基因小鼠。在FABP4启动子调控下，转基因小鼠脂肪组织中Wnt10b表达比正常情况高50倍。Wnt10b基因在正常小鼠的白色和棕色两种脂肪组织内的作用不同，转基因小鼠只有正常白色脂肪的一半，而没有棕色脂肪，这使得它无法维持自身体温从而容易受到寒冷的攻击。研究人员无法解释这种转基因小鼠的皮肤比正常小鼠厚2倍，体重较重，耗氧量也较少，然而更奇怪的是它们活得都很健康。 脂肪组织负责产生机体响应胰岛素的leptin
1、 选取7~8周龄雌性小鼠，阴道口封闭，作为供体，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。 2、 47~48小时后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并与正常公鼠合笼；另取数只适龄母鼠（2月龄以上）作为受体，阴道口潮红，与结扎公鼠合笼。 3、第二天上午9:00前观察供体、受体，有精栓者拿出备用。受体笼拿出作好隔离措施。 4、10:30左右，断颈处死供体，手术取出整个输卵管，放入透明质酸酶~0.3mg/M2液中。显微镜下，用镊子撕开输卵管壶腹部，受精
1、 选取7~8周龄雌性小鼠，阴道口封闭，作为供体，下午3:00左右，每只小鼠腹腔注射PMSG（10 IU）。2、 47~48小时后，每只小鼠腹腔注射HCG（0.8 IU），并与正常公鼠合笼；另取数只适龄母鼠（2月龄以上）作为受体，阴道口潮红，与结扎公鼠合笼。3、第二天上午9:00前观察供体、受体，有精栓者拿出备用。受体笼拿出作好隔离措施。4、10:30左右，断颈处死供体，手术取出整个输卵管，放入透明质酸酶~0.3mg/M2液中。显微镜下，用镊子撕开输卵管壶腹部，受精卵随同颗粒细胞即一同流出
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