保存条件: -20℃避光保存,一年有效。 注意事项: 为避免反复冻融,本产品配制成溶液后建议适当分装后-20℃或-80℃保存。为防止氧化,如有条件,可以对储存液充氮气或氩气后保存。 对于检测灵敏度要求特别高的实验,建议使用新鲜配制的本产品。 注射方式、动物类型以及体重等都会影响体内萤光的信号强度及稳定性,建议每次实验都要做萤光素酶动力学曲线,确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。 D-萤光素钾盐和D-萤光素钠盐都常用于动物活体成像分析和体外生物发光检测,两者效果基本相同,其主要的差别在于外形和溶解性,钠盐的水溶性高于钾盐。从目前发表的文献来看,钾盐的使用率远高于钠盐,尤其是体内实验。 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明: 1. 动物活体成像分析(以小鼠为例): a. 用无菌的D-PBS(不含Mg2+和Ca2+)溶解本产品,配制成15mg/ml的D-萤光素钾盐溶液,0.2μm滤膜过滤除菌。混匀后立即使用或分装后-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。使用时注意避光。 b. D-萤光素钾盐的水溶性和脂溶性都非常好,很容易穿透细胞膜和血脑屏障,在体内扩散速度快,可通过腹腔注射或尾静脉注射进入动物体内。腹腔注射或尾静脉注射时,按照10μl/g的体重浓度,向小鼠体内注射萤光素钾盐溶液,如20g的小鼠,注射200μl共3.0mg D-萤光素钾盐;如果是肌肉注射,一般是注射50μl浓度为1-2mg/ml的D-萤光素钾盐工作液。 c. 注射入体内10-20min后,待萤光信号达到最强稳定平台期,再用适当仪器进行成像分析。 2. 体外生物发光分析: a. 将本产品配制成30mg/ml的储存液(200X)。混匀后立即使用或分装后-20℃保存。 b. 用预热好的完全培养液1:200稀释D-萤光素钾盐储存液,使D-萤光素钾盐的终浓度为150μg/ml (1X)。 c. 去除培养细胞的原有培养液。 d. 在成像前加入150μg/ml D-萤光素钾盐工作液到细胞中,37℃孵育5分钟以让足量D-萤光素钾盐进入细胞内,随后立即用适当仪器进行成像分析。 注:本产品用于动物活体成像分析、体外生物发光检测的最佳工作浓度、检测时间请自行参考相关文献,或根据实验目的、所培养的特定细胞和组织等,通过预实验进行摸索和优化。